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重庆市万州分水中学高考生物 复习考点四 DNA的粗提取与鉴定 新人教版选修1VIP免费

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重庆市万州分水中学高考生物复习考点四DNA的粗提取与鉴定新人教版选修11.基本原理2.操作过程材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织――→去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质――→DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,沸水中加热5min,溶液变成蓝色易错警示(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。(2)实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次的目的是稀释NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。2.下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入____________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的____________。(3)步骤三、四的操作原理是________________________________________________________________________________________________________________________;步骤四中,通过向溶液中加入____________调节NaCl溶液的物质的量浓度至____________mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七:向步骤六过滤后的____________中加入等体积的冷却的____________,静置2~3min,溶液中会出现________色丝状物,这就是粗提取的DNA。(5)步骤七:DNA遇____________试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈______色。答案(1)蒸馏水(2)滤液(3)DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质蒸馏水0.14(4)滤液酒精白(5)二苯胺蓝解析破碎红细胞应用蒸馏水,使之吸水涨破。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,在2mol/L的NaCl溶液中DNA溶解,在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA析出。可通过加入蒸馏水将2mol/L的NaCl溶液稀释为0.14mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精,遇二苯胺加热呈蓝色。1.DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度比较2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液溶解规律DNA溶解析出蛋白质部分发生盐析沉淀溶解NaCl溶液从2mol/L降低过程中,溶解度逐渐增大2.DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较试剂浓度用途原理(“△”为实验的主要原理)NaCl溶液2mol/L溶解DNADNA在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变,溶解度在2mol/L时最大、在0.14mol/L时最△0.14mol/L析出DNA2mol/L鉴定时的溶剂小酒精95%(体积分数)除去杂质以提纯DNADNA不溶于酒精,但是细胞中的某些物质可以溶于酒精△二苯胺鉴定剂DNA遇二苯胺(沸水浴)会变蓝色△柠檬酸钠0.03g/mL抗凝剂除去血液中的钙离子,防止血液凝固3.DNA粗提取实验材料和方法的选择(1)不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。(2)材料不同所采用的提取方法不同①植物组织:取材→研磨→过滤→沉淀。②鸡血:制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。

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