强化练(2)1.(2019吉林长春质量检测)细胞色素P450酶在萜类天然产物的合成过程中起重要(羟基化)作用,自然条件下细胞色素P450酶与其伴侣蛋白CPR(为P450酶传递电子)在细胞内分别表达,催化效率较低。研究人员推测,若将P450酶与CPR通过一段linker(3~9个氨基酸组成的柔性肽链)融合表达成一个蛋白(如图),催化效率会有不同程度的提高。请回答:(1)首先从预期融合蛋白的功能出发,设计预期融合蛋白的结构,推测其,设计相应的。融合蛋白的表达顺序为CPR-linker-P450,设计时应将CPR基因的删除,保证融合蛋白基因连续表达。(2)欲进一步探究linker长度对P450酶催化效率的影响,简述基本实验思路:,本实验还应设置的对照组是。(3)PCR技术扩增融合蛋白基因时,所遵循的原理是,将模板DNA加热至90~95℃的目的是。答案(1)应有的氨基酸序列脱氧核苷酸序列终止子(2)设计不同长度的linker,探究其对P450酶催化效率的影响不加linker测定P450酶的催化效率(3)DNA双链复制使DNA变性解析(1)根据蛋白质工程的基本原理,改造和合成蛋白质时,首先从预期融合蛋白的功能出发,设计预期的融合蛋白的结构,推测其应有的氨基酸序列,设计相应的脱氧核苷酸序列。为了使融合蛋白按照CPR-linker-P450的顺序表达,设计时应将CPR基因的终止子删除,保证融合蛋白基因连续表达。(2)根据实验目的可知,实验的自变量为linker的长度,需设计不同长度的linker,探究其对P450酶催化效率的影响,并以不加linker时P450酶的催化效率为对照组进行探究。(3)PCR技术的原理是DNA双链复制,在扩增融合蛋白基因时,将模板DNA加热至90~95℃的目的是使DNA分子变性解链为单链,使引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下,进行延伸,如此重复循环数次。2.(2019山东济南三模)回答下列问题:(1)格登用紫外线照射非洲爪蟾未受精的卵细胞,然后将非洲爪蟾肠上皮细胞的细胞核注入其中,最终得到克隆爪蟾,该实验证明了。与动物体细胞核移植相比,胚胎细胞核移植比较容易成功的原因是;在进行核移植前,可采用方法(答出2项)去除受体细胞的遗传物质。(2)大多数哺乳动物排出的卵母细胞需要培养到期才具有受精的能力;处于该时期的细胞进行核移植后得到的重构卵可采用方法激活,从而恢复分裂周期。(3)根据病毒的结构和生理特点,病毒常在基因工程上作为;在细胞工程上作为促融剂之前需要进行处理。答案(1)高度分化的动物细胞核仍然具有全能性动物胚胎细胞分化程度低,细胞核全能性更容易表达显微操作去核、紫外光短时间照射(2)MⅡ中物理或化学(如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)(3)运载体灭活解析(1)格登用紫外线照射非洲爪蟾未受精的卵细胞,然后将非洲爪蟾肠上皮细胞的细胞核注入其中,最终得到克隆爪蟾,该实验证明了高度分化的动物细胞核仍然具有全能性。与动物体细胞核移植相比,胚胎细胞核移植比较容易成功的原因是动物胚胎细胞分化程度低,细胞核全能性更容易表达;在进行核移植前,可采用显微操作去核、紫外光短时间照射方法去除受体细胞的遗传物质。(2)大多数哺乳动物排出的卵母细胞需要培养到MⅡ中期才具有受精的能力;处于该时期的细胞进行核移植后得到的重构卵可采用物理或化学方法(如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活,从而恢复分裂周期。(3)根据病毒的结构和生理特点,病毒常在基因工程上作为载体;在细胞工程上作为促融剂之前需要进行灭活处理。3.(2019山西晋中适应性考试)人乳铁蛋白是一种具有免疫作用的含铁的糖蛋白,由乳腺上皮细胞表达和分泌,是母乳与普通婴儿配方奶粉的主要区别之一。应用基因工程和胚胎工程技术,将人乳铁蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳腺细胞生产出人乳铁蛋白已成为可能。其过程大致如下:Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子,通过体外受精形成受精卵。Ⅱ.将人乳铁蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞。Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞,促使其形成早期胚胎。Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因牛,从乳汁中获得大量人乳铁蛋白。请回答下列问题:(1)过程Ⅰ在获取卵母细胞之前需用促性腺激素对供体奶牛进行处理,目的是。在体外受精前,需要对奶牛的精子进行处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受...
