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竹红菌中竹红箘素的提取分离纯化VIP免费

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竹红箘中分离提纯竹红箘素一、实验原理竹红菌甲素是一种重要的苝醌类衍生物.作为一种性能优良的天然光敏色素,它不仅具有抗肿瘤活性、杀菌活性,还可作为一种新型的光疗药物.最近研究发现,胶束体系中的HA无论在光照或者黑暗条件下,对多种农作物病原菌具有较好的抑制效果.因此,HA在医药、农药领域具有广阔的应用前景.竹黄菌是我国一种稀有的寄生性药用真菌,属于子囊菌亚门中的肉座菌科、竹黄属,通常寄生于竹的幼茎、细嫩杆、枝上,多分布于四川、江苏、浙江、安徽以及福建等地.其子座可入药,称为竹黄,别名竹赤团子、竹花、竹三七等,多用于镇咳化痰,治疗风湿性关节炎、胃气痛等.二、实验药品及仪器药品:竹红箘式样、丙酮、氯仿、氢氧化钠、石油醚、乙酸乙酯、HCL、95%乙醇实验仪器:天平、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、索氏提取装置三、实验内容1.竹红箘素的提取称取5g竹红箘式样用滤纸包好置于索氏提取器中,在洗净的250ml圆底烧瓶中加入100ml丙酮,装上冷凝管,在电热套上加热至沸,并保持微沸,发生虹吸4~5次停止加热,得到丙酮提取液。将丙酮提取液转入旋转蒸发仪中,减压蒸馏回收丙酮,病蒸至干。将结晶后的竹红箘素用10%的NaOH溶解并用石油醚洗涤,并通过旋转蒸发仪回收石油醚。1、纯化分离竹红菌素在提取物中加入稀的HCL溶液调节提取物至中性,并用氯仿萃取多次,再将溶液转入旋转蒸发仪中,回收氯仿。制得HA粗提取物。将得到的粗提取物通过硅胶薄层色谱进行纯化分离,展开剂为石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇95%体积比为4:2:1,就可以制得较纯的竹红甲素。四、薄层色谱板的制备1.玻璃板用一块玻璃板涂上很薄的吸附剂,如硅胶或氧化铝等,玻璃板要求薄厚一致,大小相同,表面光滑平整,一般玻璃只要合乎这些要求就可。如果找不到平整均一的,将旧光学照像底片截成同样大小也可以。用前先将玻璃用肥皂和水洗干净,必要时浸泡在清洗液中,然后水洗烤干,用纱布擦光。玻璃板大小有各种规格,一般有20×20、20×10、20×5厘米,也有更小的,可根据需要自行设计。宽度要求至少能点开两三个样品,每两点之间相隔至少1.5厘米,玻板长度一般要满足展开10厘米的距离。点样的起点应距底边至少1.5厘米的距离。2.吸附剂应用最广泛的为硅胶和氧化铝,市场上有专供薄层色谱用的吸附剂,规格分不含粘合剂的硅胶H,氧化铝H和含有粘合剂熟石膏的硅胶G,氧化铝G,如市售硅胶G含13%熟石膏,氧化铝分中性、酸性、碱性三种。吸附剂的粒度范围最好在180-200目之间,太小了流速慢,太大则影响分离效果。如不合要求,应过筛。3.薄层板的涂布最简单的涂布方法是用两条比玻璃板厚0.25毫米的玻璃条或有机玻璃条(或在同样厚度的玻璃条下粘一层胶布),将玻璃板夹住,把调好的吸附剂浆液平铺在薄层板上,然后用一有机玻璃条或直尺,迅速均匀地向前推进,就象推血片一样,只要推进的速度均匀一致,即可得到薄厚均匀的薄层板,如在一块玻璃板末端再接一块相同的玻璃板,把剩余的装液接过去,可使涂层边缘整齐,厚度一致,吸附剂浆液的加水量和搅拌时间是涂布成败的关键,像12×8平方厘米的玻璃板需要2~3克硅胶G,加4~6毫升水即可,只要技术熟练即能涂成厚薄一致,光滑平整的一块薄层板。不同性质不同批号的吸附剂,加水量和搅拌时间有时可有差异,应根据情况摸出规律。为了达到涂布的各板厚度均匀一致,最好采用涂布器进行薄层的涂布。为了增加薄层的牢固性及易于保存,可在涂布过程中加入某些粘合剂以增加薄层的硬度。一般采用添加剂羧甲基纤维素钠(CMC—Na),应用方法是取CMC-Na1克溶于100毫升水中,加热煮沸溶解,按比例与硅胶搅匀,铺板。涂成之后先把玻板放在平面上,室内干固,再对光检查,看是不是均匀,有无气泡,平整光洁度如何,合格的上烤箱110℃加热30分钟进行活化,冷却后贮于干燥器内备用。在进行实验时,应尽量可能采用同批号涂布活化的薄层板,以减少因活化不一致引起的Rf值发生差异,目前国内市场已有成品供应,如黄岩化学分析材料厂即有各种类型的薄层板出售。五、薄层板的使用1.点样将样品溶于适当的溶剂中(应尽量避免有水),取微量注射器或玻璃毛细管截齐后,吸取一定量的检样,轻轻接...

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