山东农业大学硕士专业学位论文复合酪酸菌制剂的制备及动物应用效果研究中文摘要动物微生态制剂是利用动物体正常菌群或其相关物质制成的调整机体微生态平衡的活的微生物制剂。其通过优势菌群的生物拮抗作用、改善肠道微生态环境、增强上皮细胞的屏障层及提高动物的免疫功能等机制，在畜禽机体内发挥作用。本研究依据微生态学原理，研制开发了以酪酸菌乳酸菌和酵母菌为主的复合的酪酸菌制剂，通过在畜牧业生产中进行推广应用结果证明，该制剂具有提高畜禽机体的免疫力、防治畜禽的肠道疾病提高生产性能、减少抗生素用量、降低药物残留等功能。采用液体深层静置发酵方法，研究酪酸菌CB2菌株的培养条件，确定了合适的培养基（葡萄糖2.0%，胰蛋白胨1%、酵母膏0.5%、牛肉浸膏0.3%，(NH4)2SO40.1%,NaCl0.2%,KH2PO40.2%,Na2HPO40.1%,乙酸钠0.2%,CaCO30.1%，MgSO40.02%，MnSO40.01%，L-半胱氨酸0.02%）、合适的酸碱度在（pH7.0）、适宜的温度（35℃）和培养时间（48h），经用平板计数法测定结果发现，发酵菌体浓度达10.5×108CFU/ml，芽孢率为93%。对酵母菌Y—11和乳酸菌L-13混合培养比例进行了探讨，应用液体培养方法，于37℃发酵48h后检测结果证明，两种菌以1:4比例混合培养效果最佳。。动物饲喂试验表明，肉仔鸡服用该制剂10天后，用大肠杆菌攻毒，预防有效率达97.5%，对照组死亡率达50%；肉鸡在饲养期内使用复合酪酸菌制剂后，平均增重提高8.28%，料肉比降低5.77%，死淘率降低65%。t检验差异极显著（P≤0.01）。蛋鸡饲喂试验证明，实验组的料蛋比比对照组降低了9.52%，经方差分析，差异极显著（P＜0.01）；产蛋率比对照组提高了5.35%，差异极显著（P＜0.01）；肠道发病率和死淘率分别比对照组降低了66.7%和68.18%。表明复合酪酸菌制剂可以提高动物的生产性能，降低肠道疾病的发生，增强动物的抗病力。试验期间于14日龄、35日龄采集肉鸡粪便样品，经对双歧杆菌和大肠杆菌的数量检测结果表明，复合酪酸菌制剂能显著促进肠道内双歧杆菌的增殖，抑制大肠杆菌的生长。体外抑菌实验说明，乳酸菌L—13能产生抑菌活性物质，抑制大肠埃希氏菌的生长。1山东农业大学硕士专业学位论文关键词：复合酪酸菌制剂；深层静置发酵；抑菌；抗病力PreparationofMulti-modulaterofClostridiumButyricumanditsResearchonAnimalApplications2山东农业大学硕士专业学位论文ABSTRACTAnimalmicroecologcialmodulaterarelivemicroorganicagentswiththenormalmicroflora.Itcanexertveryimportantfunctionsthroughfollowingmechanisms:dominantmicrobialflora,colonisationresistance,improvementofecologicalenvironmentandprevementmicroflorabalance,producingantibacterial,strengtheningepithelialbarrierandenhancementofimmunityoffunctions,etc.Alotofexiperimentsandpracticalapplicationshaveprovedthatanimalmicroecollogicscannotonlyimproveanimalproductperformancebutalsohavefunctionsonpreventionandcontrolofthebacteriogenousdiseaseinintestinetract.Inthispaper,basedonthemicroecologicalprinciple,weresearchedandproducedamulti-modulaterofClostridiumbutryricumwhichincludingclostridiumbutryricums,lacticacidbacteriasandyeasts.Andwehopethatmicroecologcialmodulatercanexertitsfunctionsinthestockraising.TheculturalconditionsfortheclostridiumbutyricumstrainCB2wereoptimizedthroughadoptingthemethodofliquidstablesubmergedfermentation,includingcultivationtemperature,pHdegree,andthemaincompositionofthemedium.Theresultsshowedthattheadequatecultureconditionswere:optimalmedium,culturetempraturebeing350C,pHdegreebeing7.0,cultureperiodbeing48h.undertheconditions,cultivatedfor48h,throughcountingthelivethemicrobacteriums,theamountofCB2was10.5×108cfu/ml,therateofmaturinggemmawas93%.Toenlargedculturalscalewithin10Lfermentor,therecultof48hculturewasshowedthattheamountofCB2was10.5×108cfu/ml,therateofmaturinggemmawas93%.Yeastsy-11andLact...
