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目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,为什么?保存10代以内的细胞,因为其生物学特性未发生大的变化,最接近于体内组织或细胞的生长特性,很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。点击此处添加标题文字问题10:为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清?血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成(称为必需氨基酸),必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子(如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等);血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,细胞培养时,要保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需添加10%~20%的血清。专题一:专题2动物体细胞核移植技术和克隆动物•随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制,全能性表达很难,但细胞核内仍含有该物种所需的全套遗传基因,具有发育成完整个体的潜能,即细胞核仍具有全能性•条件:只有动物的细胞核是不行的,必须提供促进细胞核表达全能性的物质和营养条件,去核的卵母细胞是最合适的细胞,因为卵母细胞体积大、易操作,含有促进促进细胞核表达全能性的物质和营养条件动物细胞全能性的特点?二、动物体细胞核移植技术和克隆动物2.原理:1.概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。细胞核的全能性3.核移植种类(难度高)受体细胞:MⅡ期的卵母细胞胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,恢复全能性容易什么是克隆?就是无性繁殖,具体的说,是指从一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程融合后的卵细胞二、动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)动物的克隆与植物克隆一样吗?(2)用动物体细胞进行克隆的过程,其实际操作过程是什么?动物克隆过程的实际是细胞核移植(3)简述高产牛体细胞核移植过程思考二、动物体细胞核移植技术和克隆动物(MⅡ卵母细胞)减数第二次分裂中期去核的卵母细胞供体细胞注入去核卵母细胞受体细胞激活,完成分裂、发育胚胎移植二、动物体细胞核移植技术和克隆动物供体细胞(供核)细胞培养体细胞卵巢卵母细胞(MⅡ中期:供质)去核无核卵母细胞注入细胞融合重组细胞构建重组胚胎胚胎移植代孕母体生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛4.体细胞核移植过程二、动物体细胞核移植技术和克隆动物归纳:(1)共分成两大阶段:(2)移植过程用到的生物技术:核移植和胚胎移植动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等(3)严格来说新个体具有两个亲本的性状据上图思考下列问题:二、动物体细胞核移植技术和克隆动物①在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?提示:为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物②用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,想一想,这是为什么?提示:培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传代10代以内的细胞。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物③你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?提示:克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。用教材中所述的方法克隆的动物不是供核动物...

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