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屏障环境下建立COPD大鼠模型经验-许坚,骆丽斐VIP免费

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14第16卷第6期2014年6月辽宁中医药大学学报JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCMVol.16No.6Jun.,2014慢性阻塞性肺病(COPD)是一种可以预防和治疗的疾病,其特征是持续存在的气流受阻,气流受限呈进行性发展,伴有有害颗粒或气体对气道和肺所致慢性炎症反应的增加。其发病的关键机制是各种外界致病因素在易患个体导致气道、肺实质和肺血管的慢性炎症。COPD的发生多与吸烟、粉尘、空气污染、呼吸道感染相关,其本质是气道慢性非特异性炎症性疾病。目前有多种能反映人类慢性阻塞性肺病(COPD)自然发病过程的大鼠动物模型制作方法。如烟雾熏吸法、呼吸道感染法、二氧化硫熏吸法、气管内滴入刺激法、常压缺氧法、多因素致病造模法等。目前,有关大鼠COPD的研究中,常用多因素致病造模法,尤以熏香烟加气管注入脂多糖最多用。据相关文献报道大部分在30d内可成功造模。笔者在屏障环境下采用被动吸烟+气管内滴入脂多糖复合方法进行COPD大鼠模型制作,并未取得如期效果,现将笔者屏障环境下造模经过陈述如下。1实验环境在广东省中医院动物实验中心屏障环境下进行。该环境对内环境的物理、化学、微生物等因素具有严格的要求和标准。设计上基本与外界隔离,空气要经过初、中、高效三级过滤器净化后才能进入室内,该屏障环境内通常保持正压,不低于20~50Pa;进风口风速大于4m/s,出风口有防止空气倒流的装置。其空气洁净度达到10000级。空气落下菌数≤3个/皿。2材料和方法2.1动物分组选择雄性SD健康大鼠(清洁级)33只,由广东省实验动物中心提供,实验开始时体重160~180g,鼠龄5周,随机分为:模型组18只和空白对照组15只。2.2主要试剂、材料、仪器脂多糖(LPS)、水合氯醛购自有田生物有限公司,免疫组化试剂购自博耀生物有限公司。椰树牌香烟(广东中烟工业有限责任公司出品)含焦油量12mg,烟气烟碱量1.2mg,烟气一氧化碳量14mg。有机玻璃密闭箱(90cm×80cm×60cm,上方有一直径为1.2cm的通气孔),自制。2.3模型制作第1、14、28、42天将大鼠以10%水合氯醛麻醉屏障环境下建立COPD大鼠模型经验许坚,骆丽斐(广东省中医院芳村分院,广东广州510000)摘要:目的:建立一种能反映人类慢性阻塞性肺病(COPD)自然发病过程的动物模型。方法:通过被动吸烟和多次气道内注入脂多糖的复合方法制作COPD大鼠模型,观察大鼠一般状态如体重、精神状态、呼吸、毛发、饮食、气道中痰液的分泌量等,并取肺组织行病理切片、免疫组化检查。结果:模型组大鼠体重未见明显下降,咳嗽、喘息症状不明显。病理切片结果提示:模型组气道破坏、炎症浸润不明显,空白组与模型组IL-8、IL-10、TNF-α免疫组化数据相比无明显差异性。结论:在屏障环境下,作者通过气道内滴入脂多糖和被动吸烟复合刺激法未能成功建立COPD大鼠模型。关键词:慢性阻塞性肺病;大鼠模型;经验中图分类号:R563文献标志码:A文章编号:1673-842X(2014)06-0014-03收稿日期:2013-12-04基金项目:广东省科技计划项目(2011B031700013)作者简介:许坚(1971-),女,广东普宁人,主任中医师,硕士,研究方向:慢性阻塞性肺疾病、肺心病。ExperienceofEstablishingCOPDRatModelinBarrierEnvironmentXUJian,LUOLifei(BranchofFangVillage,GuangdongHospitalofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou510000,Guangdong,China)Abstract:Objective:Toestablishananimalmodelwhichcanreflectthenaturalprocessofchronicobstructivepulmonarydisease(COPD).Methods:Combininglipopolysaccharide(LPS)injectioninrespiratorytractwithpassivesmokingmethod,acompositeCOPDratsmodelwasbuilt.Thegeneralstateoftherats,suchasbodyweight,mentalstatus,respiratory,hair,diet,airwaymucussecretionandsoonwereobserved.Thelungtissuebiopsyandimmunohistochemicalwereexamined.Results:Nosignificantdecreaseofbodyweightofratsinthemodelgroupwasobserved.Coughingandwheezingwerenotobvious.Resultsofbiopsysuggestedthatdamageofrespiratorytractandinflammatoryinfiltrationwerealsonotobvious.Thecontrolgroupandmodelgroup'sIL...

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