屏障环境下建立COPD大鼠模型经验-许坚,骆丽斐VIP免费

14第16卷第6期2014年6月辽宁中医药大学学报JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCMVol.16No.6Jun.，2014慢性阻塞性肺病（COPD）是一种可以预防和治疗的疾病，其特征是持续存在的气流受阻，气流受限呈进行性发展，伴有有害颗粒或气体对气道和肺所致慢性炎症反应的增加。其发病的关键机制是各种外界致病因素在易患个体导致气道、肺实质和肺血管的慢性炎症。COPD的发生多与吸烟、粉尘、空气污染、呼吸道感染相关，其本质是气道慢性非特异性炎症性疾病。目前有多种能反映人类慢性阻塞性肺病（COPD）自然发病过程的大鼠动物模型制作方法。如烟雾熏吸法、呼吸道感染法、二氧化硫熏吸法、气管内滴入刺激法、常压缺氧法、多因素致病造模法等。目前，有关大鼠COPD的研究中，常用多因素致病造模法，尤以熏香烟加气管注入脂多糖最多用。据相关文献报道大部分在30d内可成功造模。笔者在屏障环境下采用被动吸烟+气管内滴入脂多糖复合方法进行COPD大鼠模型制作，并未取得如期效果，现将笔者屏障环境下造模经过陈述如下。1实验环境在广东省中医院动物实验中心屏障环境下进行。该环境对内环境的物理、化学、微生物等因素具有严格的要求和标准。设计上基本与外界隔离，空气要经过初、中、高效三级过滤器净化后才能进入室内，该屏障环境内通常保持正压，不低于20~50Pa；进风口风速大于4m/s，出风口有防止空气倒流的装置。其空气洁净度达到10000级。空气落下菌数≤3个/皿。2材料和方法2.1动物分组选择雄性SD健康大鼠（清洁级）33只，由广东省实验动物中心提供，实验开始时体重160~180g，鼠龄5周，随机分为：模型组18只和空白对照组15只。2.2主要试剂、材料、仪器脂多糖（LPS）、水合氯醛购自有田生物有限公司，免疫组化试剂购自博耀生物有限公司。椰树牌香烟（广东中烟工业有限责任公司出品）含焦油量12mg，烟气烟碱量1.2mg，烟气一氧化碳量14mg。有机玻璃密闭箱（90cm×80cm×60cm，上方有一直径为1.2cm的通气孔），自制。2.3模型制作第1、14、28、42天将大鼠以10%水合氯醛麻醉屏障环境下建立COPD大鼠模型经验许坚，骆丽斐（广东省中医院芳村分院，广东广州510000）摘要：目的：建立一种能反映人类慢性阻塞性肺病（COPD）自然发病过程的动物模型。方法：通过被动吸烟和多次气道内注入脂多糖的复合方法制作COPD大鼠模型，观察大鼠一般状态如体重、精神状态、呼吸、毛发、饮食、气道中痰液的分泌量等，并取肺组织行病理切片、免疫组化检查。结果：模型组大鼠体重未见明显下降，咳嗽、喘息症状不明显。病理切片结果提示：模型组气道破坏、炎症浸润不明显，空白组与模型组IL-8、IL-10、TNF-α免疫组化数据相比无明显差异性。结论：在屏障环境下，作者通过气道内滴入脂多糖和被动吸烟复合刺激法未能成功建立COPD大鼠模型。关键词：慢性阻塞性肺病；大鼠模型；经验中图分类号：R563文献标志码：A文章编号：1673-842X(2014)06-0014-03收稿日期：2013-12-04基金项目：广东省科技计划项目（2011B031700013）作者简介：许坚（1971-），女，广东普宁人，主任中医师，硕士，研究方向：慢性阻塞性肺疾病、肺心病。ExperienceofEstablishingCOPDRatModelinBarrierEnvironmentXUJian，LUOLifei（BranchofFangVillage，GuangdongHospitalofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou510000，Guangdong，China）Abstract：Objective：Toestablishananimalmodelwhichcanreflectthenaturalprocessofchronicobstructivepulmonarydisease（COPD）.Methods：Combininglipopolysaccharide（LPS）injectioninrespiratorytractwithpassivesmokingmethod，acompositeCOPDratsmodelwasbuilt.Thegeneralstateoftherats，suchasbodyweight，mentalstatus，respiratory，hair，diet，airwaymucussecretionandsoonwereobserved.Thelungtissuebiopsyandimmunohistochemicalwereexamined.Results：Nosignificantdecreaseofbodyweightofratsinthemodelgroupwasobserved.Coughingandwheezingwerenotobvious.Resultsofbiopsysuggestedthatdamageofrespiratorytractandinflammatoryinfiltrationwerealsonotobvious.Thecontrolgroupandmodelgroup'sIL...