实验一显微镜的基本知识及使用方法实验一显微镜的基本知识及使用方法一、目的要求一、目的要求学习显微镜的原理、使用方法和保养。利用显微镜观察微生物标本学习显微数码系统的使用方法。学习生物绘图。二、实验程序二、实验程序了解显微镜的构造、原理利用显微镜观察微生物标本了解显微数码系统的使用方法生物绘图与拍照三、实验材料三、实验材料微生物染色装片标本。显微镜、计算机、香柏油、二甲苯或乙醇乙醚混合液、擦镜纸等。四、实验步骤四、实验步骤（一）了解显微镜的构造、原理链接实验录相1、光学部分：接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等)。它使检视物放大，造成物象。2、机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。它起着支持、调节、固定等作用。显微镜的构造图1-2光学显微镜的成像原理倒立的虚像工作原理工作原理1、放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数2、显微镜的分辨率是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为：D=λ/2n·sin(α/2)式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。：可见光的波长（平均0.55m)n:物镜和被检标本间介质的折射率。：镜口角（即入射角）。3、数值孔径N.A=n.sin（α/2）①干燥系物镜以空气为介质，如常用的40×以下的物镜，数值孔径均小于1。②油浸系物镜常以香柏油为介质，此物镜又叫油镜头，其放大率为90×—100×，数值孔值大于1。根据物镜放大率的高低，可分为：①低倍物镜指1×—6×，NA值为0.04—0.15；②中倍物镜指6×—25×，NA值为0.15—0.40；③高倍物镜指25×—63×，NA值为0.35—0.95；④油浸物镜指90×—100×，NA值为1.25—1.40。油镜使用的原理油镜使用的原理增加照明亮度：油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。提高分辨率：香柏油（n=1.515）为介质时，其折射率与玻璃相近，光线经过载玻片后可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射，从而增加数值孔径达到提高分辨率的目的。（二）了解显微数码系统的使用方法链接演示显微数码系统软件的使用方法演示拍照的方法图片保存要求建文件夹：D:\环境0511班200522200****图片：格式：JPG文件名：环境200522200****大肠杆菌（10×100）（三）（三）利用显微镜观察微生物标本1、观察前的准备2、低倍镜观察3、高倍镜观察4、油镜观察5、镜检完毕后的处理1、观察前的准备（1）将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为3－4cm。检查零件是否齐全，镜头是否清洁。（2）调节光亮度（3）调节目镜及数值孔径大小链接实验录相22、低倍镜观察、低倍镜观察将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方。转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止。用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。链接实验录相33、高倍镜观察、高倍镜观察在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。较好的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在正常情况下，高倍物镜的转换不应碰到载玻片或其上的盖玻片。若使用不同型号的物镜，在转换物镜时要从侧面观察，避免镜头与玻片相撞。然后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节粗调节旋钮，使载物台下降，直至物像出现，再用细调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部位，并移至视野中央进行观察。链接实验录相（1）升高镜筒，将油镜转至工作位置。在玻片标本区域滴加香柏油。（2）从侧面注视，用粗调节器慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中几乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头。（3）将光线调亮，目镜观察，用细调节器校正焦距，直至物像看清为止。仔细观察并绘图。链接实验录相4、油镜观察55、镜检完毕后的处理...
