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血红蛋白的提取与分离.VIP免费

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课题3血红蛋白的提取和分离((一)蛋白质一)蛋白质占细胞干重的占细胞干重的5050%以上,细胞中含量最多的%以上,细胞中含量最多的有机物有机物22、组成元素、组成元素CC、、HH、、OO、、NN一、基础知识一、基础知识11、含量、含量33、相对分子质量、相对分子质量高分子化合物高分子化合物44、基本组成单位、基本组成单位氨基酸氨基酸55、氨基酸通式、氨基酸通式RRHHCCCOOHCOOHNHNH2266、氨基酸连接方、氨基酸连接方式式脱水缩合脱水缩合88、分子结构、分子结构77、肽键、肽键COCONHNH氨基酸氨基酸肽链肽链蛋白质蛋白质脱水缩合脱水缩合盘曲折叠盘曲折叠(一条或者多条)(一条或者多条)1010、生理功能、生理功能细胞和生物体的结构物质,是人体发育和组细胞和生物体的结构物质,是人体发育和组织更新的主要原料,具有运输、调节、免疫、织更新的主要原料,具有运输、调节、免疫、催化等作用,是一切生命活动的主要承担者催化等作用,是一切生命活动的主要承担者氨基酸的种类不同;数目成百上千;排列顺氨基酸的种类不同;数目成百上千;排列顺序变化多端;多肽链的空间结构千差万别序变化多端;多肽链的空间结构千差万别99、蛋白质结构的多样性、蛋白质结构的多样性①①氨基酸间脱水缩合时,原来的氨基和羧基就不氨基酸间脱水缩合时,原来的氨基和羧基就不存在了,形成的化合物即多肽的一端只有一个氨存在了,形成的化合物即多肽的一端只有一个氨基,另一端只有一个羧基(不计基,另一端只有一个羧基(不计RR基上的氨基和基上的氨基和羧基)。所以对于一条多肽链说,至少应有的氨羧基)。所以对于一条多肽链说,至少应有的氨基和羧基都是一个基和羧基都是一个②②若有个若有个nn氨基酸分子缩和成氨基酸分子缩和成mm条肽链条肽链,,则可则可形成形成n-mn-m个肽键个肽键,,脱去个脱去个n-mn-m个水分子,个水分子,至有氨基和羧基各至有氨基和羧基各mm个个1111、相关计算、相关计算③③蛋白质可以含有一条或蛋白质可以含有一条或nn条肽链、肽链通过条肽链、肽链通过化学键(如二硫键)互相连接,具有不同的空间化学键(如二硫键)互相连接,具有不同的空间结构结构④④关于蛋白质相对分子量的计算:关于蛋白质相对分子量的计算:nn个氨基酸形个氨基酸形成成mm条肽链,每个氨基酸的平均相对质量为条肽链,每个氨基酸的平均相对质量为a,a,那那么由此形成的蛋白质的相对分子量为么由此形成的蛋白质的相对分子量为n·a-(n-n·a-(n-m)·18m)·1811、分离生物大分子的基本思路、分离生物大分子的基本思路选用选用一定的物理或化学一定的物理或化学的方法分离具有的方法分离具有不同不同物理或化学性质物理或化学性质的生物大分子的生物大分子22、蛋白质分离和提取的原理、蛋白质分离和提取的原理根据蛋白质各种特性的差异,如根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力吸附的性质和对其他分子的亲和力等等,可等等,可以用来分离不同蛋白质以用来分离不同蛋白质((二)蛋白质的提取二)蛋白质的提取33、高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何、高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用,作用结果是什么被破坏?种作用,作用结果是什么被破坏?变性、变性、空间结构变性、变性、空间结构44、人们用鸡的红细胞提取、人们用鸡的红细胞提取DNADNA,用人的红,用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么?细胞提取血红蛋白的原因是什么?鸡的红细胞具有细胞核,含有鸡的红细胞具有细胞核,含有DNADNA,便于进,便于进行行DNADNA的提取,人的红细胞无细胞核,结构的提取,人的红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白简单,血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白(三)凝胶色谱法(三)凝胶色谱法②②实例:实例:葡聚糖、琼脂糖葡聚糖、琼脂糖33、凝胶、凝胶11、别名:、别名:分配色谱法分配色谱法①①性质:一些性质:一些微小多孔微小多孔的球体,内含许多的球体,内含许多贯贯穿的通道穿的通道22、概念:根据被分离物质的、概念:根据被分离物质的蛋白...

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