微生物检验标本采集微生物检验标本采集罗南英2016年2月25日基本原则基本原则1.抗生素使用前；2.无菌采集，避免污染（环境、正常菌群等）3.及时送检，通常室温不超过2h。4..运送过程避免污染、渗漏、脱盖、密封不好等5.如疑似对低温敏感的淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌感染标本应立即处理。脑脊髓液、生殖道、眼睛、内耳标本绝不可以冷藏。血液及骨髓标本血液及骨髓标本一、标本送检指征病人出现以下临床表现之一时,应采集血培养。①发热（≥38℃）或低温（≤36℃）；②寒战；③白细胞增多（＞10×109/L，特别有“核左移”时）；④粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×109/L）；⑤血小板减少；⑥皮肤、粘膜出血；⑦昏迷；⑧多器官衰竭；⑨血压降低；⑩呼吸加快。几种特殊情况：几种特殊情况：①可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。②老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。★骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。【标本的采集方法】【标本的采集方法】防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。1皮肤消毒程序：用蘸有复合碘棉签从穿刺点向外以1.5～2cm直径画圈进行消毒，消毒皮肤作用60s。★对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺消毒部位干燥后穿刺采血。2培养瓶消毒程序①用75％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞子，作用60s。②在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。3培养瓶接种程序抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中。（蝶形针/注射器）血培养采集的时间和频率血培养采集的时间和频率①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3套血培养，每套包括1个需氧瓶+厌氧瓶。因为研究已证实，2～3套血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。②入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2套，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。③对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。④怀疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2～3套血培养。⑤不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2～3套血标本，24～36h后估计体温升高之前，再采集2套以上。⑥怀疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，选择其它种类的培养瓶，如高渗培养瓶，中和抗生素培养瓶，结核菌培养瓶等，以获得罕见的或苛氧的微生物。⑦怀疑为细菌性心内膜炎，在1～2h内多部位采集3份血标本，如果24h阴性，再采取3套以上的血标本。⑧怀疑为细菌性脑膜炎应在发热的头1～2天内，怀疑为伤寒应在发热第一周内；怀疑为布鲁菌病应在预期发热前取血；经培养24～48小时如未见细菌生长，应再连续取血两次。⑨静脉采血通常用肘正中静脉，怀疑亚急性细菌性心内膜炎也可自股动脉采血。对血培养阴性而高度怀疑伤寒或布鲁菌病者，可抽取骨髓培养和辅助血清学试验有助于诊断。2采血量2采血量成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为8～10ml。儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～3ml用于血培养。骨髓采血量一般为1～2ml。★血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3～5％。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌的生长。3标本的保存及运送3标本的保存及运送含血样的培养瓶应立即送往实验室；如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降在运往实验室的...
