·332·生堡璺叠盘查垫!!生皇旦筮笪鲞筮堡塑￡!垫』业!尘地丛：趔!垫!!：!吐盟：堕垒兰AG490阻断Stat3信号蛋白活性对巩膜成纤维细胞MMP一2和Integrin[31表达的影响朱子诚张金嵩柯根杰【摘要】目的研究AG490阻断Stat3信号转导通路激活对豚鼠巩膜成纤维细胞MMP-2和Integrinp。表达的影响。方法实验研究。选用传3代处于对数生长期豚鼠巩膜成纤维细胞。实验共分4个组，分别为A组(空白对照组)：不加胰岛素生长因子1(IGF一1)的DMEM培养液、B组(单纯IGF-l组)、C组(IGF—l+PBS组)、D组(IGF-1+25p。mol／LAG490组)。置入37oCC02细胞培养箱中培养48h后终止培养。采用RT-PCR和免疫印迹检测4组中Star3、MMP-2、IntegrinB。mRNA水平和Stat3、p-StaG(结合位点Tyr-705)、MMP-2、Integrinp．的蛋白含量变化。用配对t检验和one-wayANOVA方法对测得的数据作处理分析。结果A、B、c、D组Stat3蛋白表达量分别为0．0637±o．0024、0．6167±o．0276、0．6141±0．0271、0．0674±o_0044，mRNA表达量分别为0．3600±0．0148、0．6315±0．0003、0．6311±0．0001、0．3702士0．0142；p-StaG蛋白表达量分别为0．0031±0．0000、0．4252±0．0107、0．4274±0．0040、0．0032±0．0000，MMP2蛋白表达量分别为0．0044±0．0002、0．5252±0．0083、0．5251±0．0076、0．0053±0．0003，mRNA表达量分别为0．3067±0．0196、0．5894±0．0122、0．5858±O．0083、0．3107±0．0082。与A、D组比较，B、C组的Stag、P-Stat3、MMP-2蛋白和基因转录水平明显上调(t。=一32．324，一26．284，一32．876，一26．345，一68．668，一58．724，一187．481，一58．842，一110．264，一120．256，一121．345，一120．286；f。删=一31．554，一31．178，一31．286，一31．198，一12．076，一14．969，一11．896，一14．546；均PO．05)；而IntegrinBl在4个组中无明显改变(巳=0．214；F。RM=0．045，均P>o．05)。结论AG490阻断Stat3信号通路激活可下调豚鼠巩膜成纤维细胞MMP．2的表达，AG490可以阻断Stat3信号通路激活，是否可作为预防近视的靶点候选药物有待进一步研究。f中华腰科杂志，2011，47：332-335)【关键词】STAT3转录因子；酷氨酸磷酸化抑制剂；近视；巩膜基质金属蛋白酶2；抗原，CD29EffectsofblockingactivationofIGF-1-StaffsignalingpathwayinguineapigsclerafibroblastbyAG490onexpressionofMMP-2andIntegrinBl删UZi—cheng。ZHA^BJin—song，KE＆凡一肚DepartmentofOphthalmology，AnhuiMedicalUnivers蚵，Af舭tedProvincial舶驴豇以Hefei230001，ChinaCorrespondingauthor：zHUzi—cheng．Email：zczhul23@163．collg【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofBlockingactivationofIGF一1一Stagsignalingpathwayinguineapigselerafibroblast(GSFs)byAG490onexpressionsofMMP-2，IntegrinBl．MethotisCulturedGSFsweredividedintofourgroups：groupA(controlgroup：onlyDMEMwithoutIGF-1)，groupB(onlyIGF一1group)，groupC(IGF-1+PBSgroup)，groupD(IGF-l+25¨moL／LAG490group)．，rIleexpressionsofStat3，P．Stat3，MMP-2，IntegrinBlproteinindueedbyIGF—landinhibitedbyAG490inGSFsweredetectedbyWestemblot．ThelevelsofStat3，MMP-2andInte蛳n13ImRNAweredetectedbyRT-PCRResul招ComparedwithGroupsAandD，Star3，p-StaG，MMP-2proteinexpressioningroupsBandCwereexpressedathisherlevel(t。，=一32．324，一26．284，一32．876，一26．345，一68．668，一58．724，一187．481，一58．842，一110．264，一120．256，一121．345，一120．286；t。RNA=一31．554，一31．178，一31．286，一31．198．一12．076。一14．969，一11．896，一14．546，P<0．05)，buttheexpressionlevelswerenotobviouslydifferentbetweengroupsBandC(tp=一32．720，一32．816，一68．668，一187．48l，一110．264，一121．345；￡删=一0．692，一0．579，P>0．05)，whichwer...
