专题二微生物的培养与应用课题课题33分解纤维素的微生物分解纤维素的微生物的分离的分离一一..基础知识基础知识㈠㈠..纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶1.1.纤维素纤维素纤维素是一种由纤维素是一种由葡萄糖葡萄糖首尾相连而首尾相连而成成的的高分子高分子化合物,是含量最丰富的化合物,是含量最丰富的多糖多糖类物质。类物质。思考:纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨,但却不会在地球上大量的积累,为什么?纤维素能被土壤中某些微生物分解纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生利用,这是因为它们能够产生纤维素酶纤维素酶。。棉花棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。是自然界中纤维素含量最高的天然产物。2.2.纤维素酶纤维素酶纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶,一般认为它,一般认为它至少包括三种组分至少包括三种组分,即,即CC11酶酶((外切外切酶酶))、、CCXX酶酶((内切酶内切酶))和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶,前,前两种酶使纤维素分解成两种酶使纤维素分解成纤维二糖纤维二糖,第三种,第三种酶将酶将纤维二糖纤维二糖分解成分解成葡萄糖葡萄糖。。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素一一..基础知识基础知识㈠㈠..纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶能分解纤维素的微生物,有各种能分解纤维素的微生物,有各种细菌、真菌和少数放线菌。细菌、真菌和少数放线菌。一一..基础知识基础知识㈠㈠..纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶3.3.纤维素的分解:纤维素的分解:一一..基础知识基础知识㈡㈡..纤维素分解细菌的筛选纤维素分解细菌的筛选::1.1.方法:方法:刚果红染色法。刚果红染色法。刚果红刚果红可以与可以与纤维素纤维素形成形成红色复合红色复合物物,当纤维素被,当纤维素被纤维素酶纤维素酶分解后,红色分解后,红色复合物无法形成,复合物无法形成,出现以出现以纤维素分解菌纤维素分解菌为中心的为中心的透明圈透明圈,我们可以通过,我们可以通过是否产是否产生透明圈生透明圈来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。2.2.原理:原理:一一..基础知识基础知识㈡㈡..纤维素分解细菌的筛选纤维素分解细菌的筛选::该方法可以通过该方法可以通过颜色颜色反应反应直接直接筛选。筛选。一一..基础知识基础知识㈡㈡..纤维素分解细菌的筛选纤维素分解细菌的筛选::3.3.优点:优点:二二..实验设计与操作实验设计与操作㈠㈠..实验设计:实验设计:土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培纤维素分解菌的培养基上养基上挑选产生透明圈挑选产生透明圈的菌落的菌落①①分布环境分布环境11、土壤取样:、土壤取样:富含纤维素的环境中富含纤维素的环境中操作步骤操作步骤由于由于生物适应一定的环境,环境对生物有选生物适应一定的环境,环境对生物有选择作用择作用,在富含纤维素的环境中,纤维素分,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。得目的微生物的几率要高于普通环境。②②原因原因③③实例:树林中多年落叶形成的腐殖实例:树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等。土,多年积累的枯枝败叶等。④④讨论讨论::如果找不到合适的环境,可以将如果找不到合适的环境,可以将滤纸埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什滤纸埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋在土壤中多深?么作用?你认为滤纸应该埋在土壤中多深?答:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分答:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中,实际上是解菌相对集中,实际上是人工设置纤人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境维素分解菌生存的适宜环境。一般应。一般应将滤纸埋于深约将滤纸埋于深约10cm10cm左右左右的土壤中。的土壤中。22、选择培养、选择培养增加增加纤维素分解菌的纤维素分解菌的浓度浓度,以,以确保确保能够能够从样品中从样品中分离所需要的微生物分离所需要的微生物。。①①目的:目的:阅读书本P29纤...