热板法镇痛试验VIP专享VIP免费

授课纲要热板法镇痛实验Analgesicexperimentswithhotplatemethod一、实验目的1.掌握镇痛药的实验法;2.观察麻醉性镇痛药哌替啶（dolantin杜冷丁）与非麻醉性镇痛药罗通定（rotundine）的镇痛效应。二、实验原理疼痛(pain)伤害性刺激所引起的情绪反应、行为反应以及生理功能障碍，是许多疾病的症状，是机体受到不良刺激或损害的一种信号和反应。锐痛和钝痛。疼痛模型1.热刺激模型2.机械刺激模型3.电刺激模型2.3.4化学刺激模型热刺激、机械刺激及电刺激致痛模型均适用于筛选麻醉性镇痛药－与锐痛接近化学刺激致痛模型（扭体法）适用于筛选解热镇痛药－与钝痛接近。热板法的特点：1.仪器装置简单，反应灵敏，指标明确。2.对组织损伤小，可反复利用动物。3.痛反应潜伏期长，利于比较药物镇痛作用的强弱、快慢、持续时间。4.主要用于筛选麻醉性镇痛药，并不适用于筛选解热镇痛药，后者可使用化学性致痛模型进行评价。镇痛药(analgesics)的定义和分类1.麻醉性镇痛药-依赖性和成瘾。2.非麻醉性镇痛药-包括中枢性和周围性两类，如NSAIDs。哌替啶（dolantin杜冷丁）1.合成品，吗啡代用品,较吗啡的成瘾性轻;2.作用于中枢神经系统的阿片受体而发挥作用;3.镇痛效力约比吗啡弱(1/10~1／8)，持续时间也比吗啡短（0.5hr-2.5hr）。罗通定（rotundine）1.结构为四氢巴马汀;2.镇痛作用比dolantin弱，无成瘾性。3.阻断脑内DA受体，增加与痛觉有关的特定脑区脑啡肽原和内啡肽原的mRNA表达，促进脑啡肽和内啡肽的释放镇痛作用。三、实验材料和方法1.实验材料雌性小鼠；超级恒温器；2.5g/Ldolantin，2.5g/Lrotundinesulfate，生理盐水（NS）。2.实验方法将小鼠置于一定温度的热板上，热刺激小鼠足部产生痛反应，即舔足反应。以小鼠出现舔足的时间作用为痛反应指标，判断药物是否具有镇痛作用。实验步骤1.预选动物：将小鼠置于热板仪内，温度55±0.5℃，测定小鼠的痛阈值，测2次，间隔5min，以小鼠舔后足作为观察指标。预选30s内出现痛反应的小鼠。2.分组及给药：取预选合格的小鼠，随机分为三组。A组－i.p.dolantin25mg/kg(2.5g/L,0.1ml/10g)B组－i.p.rotundine25mg/kg(2.5g/L,0.1ml/10g)C组－i.p.生理盐水（0.1ml/10g）3.痛阈测定:给药后15、30、60min测定，若小鼠60s内无痛反应，立即取出，按60s计算。4．痛阈计算：实验完毕，计算各给药组的用药前后各次的小鼠热痛反应时间(痛阈值)的平均值，计算痛阈提高百分率。图1杜冷丁、罗通定、生理盐水对小鼠痛阈值的影响四、实验注意事项1.用雌性小鼠，痛阈反应时间超过60s应立即取出以免烫伤足部;2.室温以15℃左右为宜，过低反应迟钝，过高则敏感。五、思考题：1.比较镇痛药和解热镇痛药的镇痛作用，作用机制和临床应用。