交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶抗人球蛋白法)1
目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用,保证检测结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程
适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验
职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验
原理红细胞血型抗原与不完全抗体(IgG),在抗人球蛋白的桥梁作用下,经一定的离心力,产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体(IgM)直接产生的特异性免疫凝集复合物,被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中,判为阳性结果,表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体;红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部,即判断为阴性反应,表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体
所需设备和试剂普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡6
检测环境条件室湿应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%
1先将供(受)血标本制备0
5%红细胞低离子介质(LIM)悬液
2撕开卡的封膜,于反应胶中主(次)侧管加供(受)者0
5%红细胞LIM悬液100μl,加入受(供)血者血浆或血清25μl(或50μl)
3将检测卡37℃孵育15min取出,置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min
4取出,判定结果,结果判定标准按下表:(可参照结果判定示图)阳性4+表示RBC绝大部份凝聚于凝胶表层3+表示RBC多数凝聚于凝胶表层,少数RBC凝集颗粒悬浮于近胶表层2+表示部份RBC沉积于胶底,部分RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中1+表示RBC多数沉积于胶底,可见少数RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中±表示RBC绝大多数沉积于胶底,极少数RCB凝集颗粒悬浮于近胶底dcp表示混合凝集外观,部份RBC凝集颗粒集结于凝胶表层,部分