第10卷第1期1988年3月石油实验地质EXPERIMENTALPETROLEUMGEOLOGYVol.10MarNo.11988高效快速层析法一一TLCMesh柱层析李玉林(福州大学地质系TLCMes五柱层析是根据高效液相色谱的基本原理研制出来的一种新型柱层析方法.与普通柱层析相比,它具有分离速度快、分离效果显著、设备简单、操作方便等优点.可供普通实验室配备使用.本文详细介绍了TLCMesh柱层析的实验装置、填充剂、洗脱液和装柱、进样方法等.在对原油、煤和沉积物(岩)抽提物的分析中,我们经常遇到一些尚未确认的、新的有机化合物。对于这类化合物的地球化学信息和生物信息研究来说,高效快速的分离实验技术是十分必要的。传统上,高纯度制备性分离工作都是在很长的普通层析柱上进行。这种普通柱层析方法不仅费时很大,样品回收率低,而且由于拖尾的影响,实验重复性很差。近年来国内外所使用的低压柱层析,虽大大缩短了实验时间,但分离效果并没有明显改善。另外制备性薄层层析有时亦可获得令人满意的分离效果,但同样存在效率低,样品量少等缺点。70年代以后,高效液相色谱有了很大的发展,它与普通柱层析的主要区别在于使用了粒度更细的填充剂,从而使它的分离效能及检测的灵敏度大大提高。同时,由于使用了加压技术,使分离效率比普通柱层析提高几百倍。但是,高效液相色谱需要专门的仪器设备,且价格昂贵,只有少数实验室有条件配置。国内目前主要用于少量样品的定性分析或作族组份分离,要进行常量的制备性分离和普及应用尚有困难。为此,我们根据高效液相色谱的基本原理〔‘〕〔2〕,经过多次反复实践,成功地研制出TLcMesh柱层析系统。二年多来的实践证明它是一种高效快速的有机分离实验技术,可以与制备性薄层层析相媲美。我们已经将薄层板上△Rf>0.05一。.10的不同皂贰组份有效地分离开来,获得制备性纯样。并且该方法设备简单便宜,进样范围大,从0.5一10克均已获得满意的结果。一次实验一般只需3一5个小时即可完成。所以,TLCMesh柱层析有较大的普及实用价值。一、实验装置TLcMesh柱层析的实验装置主要由氮气钢瓶、缓冲瓶、储液瓶、层析柱等四部分组成(图1)。氮气钢瓶提供层析系统压力,也可用空气压缩泵代替;缓冲瓶上装有一支带磨口玻璃活塞的排气管,以调节系统压力,使其保持平稳;层析柱长度与内径之比要大于12;储液瓶可以与层析柱直接相连,也可以分离开来,中间由导管与层析柱相连,这时储液瓶可用平底不锈钢瓶。实验时,按图1所示,安装好实验装置,然后开启‘68·石油实验地第10卷氮气钢瓶上的活塞,通过压力表上的压力调节阀调整压力大小,使洗脱液的流速控制在实验所需的范围之内。二、填充剂和洗脱液图1TLCMesh柱层析实验装置图1。氮气钢瓶5。三通活塞9。脱脂棉2。压力阀3.缓冲瓶4。磨口玻璃活塞6.磨口接头了。储液瓶8.层析柱10.馏分收集器1.填充剂填充剂是决定柱效的主要因素。从理论上讲,填充剂的颗粒越细和粒度范围越小,柱效就越高。TLCMesh柱层析一般都采用薄层层析粒级硅胶作填充剂,TLCMesh柱层析也由此而得名。只有在个别情况下才使用氧化铝、活性碳和氧化镁等作填充剂。(1)填充剂粒级选择,必须根据样品分离纯化的难易程度及组份的复杂性选用适当的粒级范围,必要时可进一步过筛。例如,在对中药白头翁皂式(街体皂武和三菇皂戒)进行分离纯化时,我们发现普通层析硅胶(10一20目)柱效很低,分离效果差。经试验以30。一40目薄层层析硅胶分离效果最佳,用小于50目时,柱效并没有明显提高,反而给装柱带来困难。总之,实验之前要注意选择填充剂的粒度范围,并不是说越细越好。(2)填充剂的活性一般不宜太高,例如街烷皂贰的分离,填充剂的活化级别以亚一皿级比较适宜。据认为〔“〕填充剂的含水量在液固相层析中往往起很重要的作用,填充剂活性太低、含水量太大对水溶性样品有潮解作用。因此,适当控制填充剂的活性级别非常必要,活性太强时可加入适量的水,使其活性降低;反之,放在烘箱内烘烤,以提高填充剂活性。填充剂一与进样量的比例也是影响柱层析效果的重要因素,一般以1:300一1:50。为宜。对于难分离的样品,可适当增加填充剂与样品量的比例。但一般不能超过1,100。,否则将影响样品的回收率。2。洗脱液TLCMesh柱层析所用的洗脱液,一般采用薄层层析法的系...
