来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达VIP免费

!!卷"期!##$年%月生物工程学报!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12&’()!!*’)"!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!+,(-!##$./0/12/3：+45,46-7$，!##$；800/9:/3：;460<$，!##$)=<1>?’6@?4>>,99’6:/3A-B645:C6’DE"FG:/D8B610,(:,64(H/946:D/5:’CI<154（*’)!##JKFF）)"I’66/>9’5315B4,:<’6)=/(：F$L7#L$FE7EFM"；NLD41(：-45BO’5BP1QD41()545@41)/3,)05)农业部E"F项目资助（*’)!##JKFF）。来源于!"#$%$%%&’(&#)$’&’的耐高温!!淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达"#$%&’’()*)+,-&.&*&/)0(*1+)%23-&%4)’,256&!!24762’&+%)4!"#$%$%%&’(&#)$&’(**+,-."/$.$0-’#1)0+-#/2))/-6)%)$62’,杨宗岐7，!，李轶女!，张志芳!，王勇7，沈桂芳!"R8*SK’5BLT17，!，UGR1L*V!，KW8*SK<1LX45B!，Y8*SR’5B7453ZWN*S,1LX45B!"7南开大学生命科学学院，天津J###%7!中国农业科学院生物技术研究所，北京7###F77!(,,%1%(-3#-%40#%$0%&，5+$6+#7$#8%*&#/2，9#+$:#$J###%7，!"#$+!.#(/%0"$(,(12;%&%+*0"<$&/#/)/%，!"#$%&%=0+>%?2(-=1*#0),/)*+,40#%$0%&，.%#:#$17###F7，!"#$+摘要来源于@2*(0(00)&-)*#(&)&的耐高温!L淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶，在植物中表达耐高温!L淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本。选择衣藻叶绿体基因组同源片段0,A@L/*$3LA%/.L0",3L*A,!JL*A,!和壮观霉素抗性基因，构建了来源于@2*(0(00)&-)*#(&)&的耐高温!L淀粉酶基因的衣藻叶绿体表达载体9$"8。通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中，经壮观霉素抗性（7##DB[U）筛选，获得了E个抗性衣藻转化子。转化子经过抗性继代筛选后，经\I.、Z’,::4A(/!L4D-(4>/C6’D@2*(0(00)&-)*#()&1>451D9’6:45:153,>:614(/5O-D/15A6/?15B4534(0’<’(96’3,0:1’5)N/^96/>>1’5’C::4A(/!L4D-(4>/159(45:>0456/3,0/B6/4:(-0’>:>15:15B06’99(45:>)80<(’6’9(4>:/^96/>>1’52/0:’6，9$"8，0’5:41515B::4A(/!L4D-(4>/B/5/C6’D@2*(0(00)&-)*#()&，?4>0’5>:6,0:/3?1:<0,A@L/*$3LA%/.L0",3L*A,!JL*A,!4>!",+?2>(?($+&*%#$"+*>/##9(4>:13<’D’(’B’,>6/0’DA1545:C64BD/5:>453>90:15’D-015L6/>1>:45:++>=B/5/4>>/(/0:D46@/6)=D139$"8?4>:645>C/66/315:’::B/5’D/’C!)*%#$"+*>/##A-::10D/:<’3)*15/153/9/53/5:(-:645>C’6D/3(15/>?/6/’A:415/3A-7##DB[U>9/0:15’D-015>/(/0:1’5)\I.4D9(1C104:1’5，Z’,:1>’C:B/5/4530,(:124:1’515:<’?/3:<4::/B/5/<43A//515:/B64:/315:’0<(’6’9(4>:B/5’D/’C!)*%#$"+*>/##)=//^96/>>/315::’C!)*%#$"+*>/##?4>3/:/0:/3A-4D-(4>/40:121:-4>>4-453C’,53:’A/4><1B<4>%%]M,[BC6/>)=//^9/61D/5:4(6/>,(:>3/D’5>:64:/3:>1A1(1:-’C,>15B:645>B/5100<(’6’9(4>:>’C9(45:4>A1’6/40:’6>C’696’3,0:1’5’C153,>:614(/5O-D/>):&7;)%0’@2*(0(00)&-)*#(&)&，::4A(/!L4D-(4>/，0<(’6’9(4>:/^96/>>1’5，!",+?2>(?($+&*%#$"+*>/##耐高温!!淀粉酶是目前工业上用量最多的酶之一，广泛应用于食品、制药、酿造、发酵及纺织工业中的淀粉加工。来源于嗜热古细菌!"#$%$%%&’(&#)$’&’的胞外!!淀粉酶以其优异的耐热性能而受到关注。该酶具有很高的热稳定性，活性不依赖于钙离子，最适的反应活性在高温下实现，且半寿期长。此外，高温下酶促反应可减少杂菌的污染机会；反应不需用冷却水，可节约能源；淀粉粘稠度的降低能减少输送时的动力消耗［"］。近十几年来，随着利用植物非食品部...