2005年12月第15卷第6期中国比较医学杂志CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEDecember,2005Vo1.15No.6、口、、e;g研究报告$盼es混合性高甘油三酯/高胆固醇血症小鼠模型的培育周淑佩,张晓红,刘国庆,田枫(北京大学医学部实验动物科学部,北京100083)【摘要】目的通过脂蛋白脂酶(1ipoproteinlipase,LPL)~因敲除极度高甘油三酯血症小鼠LPLO与ApoE基因敲除高胆固醇血症小鼠ApoEO杂交,产生混合性高甘油三酯/高胆固醇血症小鼠模型LPLO/ApoEO。方法采用杂交、回交、互交的方法进行培育,并以重组腺病毒为载体在初生小鼠四肢肌肉内表达LPL基因有益突变体LPL447,救治出生2d内即死亡LPLO/ApoEO纯合子初生小鼠。采用从LPLO/ApoEO小鼠的个体组织(鼠尾)中提取基因组DNA进行PCR分析和血浆脂质检测个体基因型。结果LPL基因有益突变体在纯合子小鼠体内短暂表达,能够成功救治LPLO/ApoEO双基因敲除小鼠。成年小鼠表现为极度的混合性高脂血症,其血浆甘油三酯和胆固醇水平分别是正常小鼠的76和14倍。结论成功培育了LPLO/ApoEO双基因敲除的遗传性混合性高甘油三酯、高胆固醇血症小鼠模型。【关键词】脂蛋白脂酶;载脂蛋白E类;双基因敲除小鼠;繁殖【中图分类号】Q95—331【文献标识码】A【文章编号】1671—7856(2005)06—0368—04DevelopmentofCombinedHypercholesterolemic/HypertriglyceridemicMouseModelZHOUShu—pei.ZHANGXiao—hong2,LIUGuo—qing,T1ANFeng(1.TheDepartmentofLaboratou,AnimalScience,HealthScienceCenter,PekingUniversity,Beijing100083,China2.InstituteofCardiovascularScience,HealthScienceCenter,PekingUniversity,Beijing100083,China)【Abstract】ObjectiveToestablishacombinedhypercholester0lemic/hypertriglyceridemicnlousemodelbycross—breedingofIJLandApoEknockoutmice.MethodsThemodelwasdevelopedbycrossbred,backcrossandintercrossofthe2linesofknockoutmice.andrescuedh、muscularexpressionofaIJLbeneficialmutantinhomozygousneonates.ThegenotypewasdeterminedbyPCRandconfirmedbybloodlipidassay.ResultsTheIJPLandApoEdoubleknockoutmicecouldberescuedbymuscularexpressionofLPL.PlasmaTGandTClevelsinadultLPLO/ApoEOmicewereincreased76and14fold.respectively.comparedwithwild—typelittermates.Conclusionhyperchokster0lemic/hypertriglyceridemicmousemodelhasbeendevelopedsuccessfully.【Keywords】Lipoproteinlipase;ApolipoproteinsE;Doubleknockoutmice;Breeding大量新近的临床研究资料表明,高甘油三酯血症(TG)是冠心病(CHD)的独立危险因素,并伴有促动脉硬化斑块破裂的危险。脂蛋白脂酶(LPL)是机体水解甘油三酯的限速酶,在脂质代谢中起着[基金项目】自然科学基金(30270539)。[作者简介]周淑佩(1963一),女,副研究员,研究方向:实验动物管理及模型动物保种。重要作用。为了深入研究TG与CHD的关系,适当的动物模型是必不可少的。去基因小鼠是进行类似研究的最佳选择。然而敲除LPL基因的纯合子小鼠在出生后48h内全部死亡,不能开展进一步研究。我们通过体细胞LPL基因有益突变体LPL447基因转移方法,成功救治LPL基因敲除纯合子小鼠,制备了极度高甘油三酯血症小鼠模型。为了研维普资讯http://www.cqvip.com中国比较医学杂志2005年12月第15卷第6期ChinJCompMed,December2005,Vo1.15No.6369究这种小鼠对动脉粥样硬化的易感性,我们又将其与高胆固醇血症、自发性动脉粥样硬化的ApoE基因敲除小鼠交配,以期产生混合性高胆固醇,高甘油三酯血症小鼠模型,用于深入的实验研究。[3-831方法1.1培育方法本实验所用c57BL/6J遗传背景的脂蛋白脂酶基因敲除小鼠LPLO自加拿大引进,ApoEO小鼠自美国Jackson实验室引进。雄性LPLO小鼠与相同遗传背景的雌性ApoEO小鼠杂交,产生的F1代雄性小鼠与雌性ApoEO小鼠回交,在其F2代中筛选出基因型为LPL(+/-)/ApoEO的雄性、雌性小鼠,再进行互交。根据孟德尔遗传定律,其F3代中将会产生50%的LPL(+/.)/ApoEO,以及各25%的LPL(+/+),ApoEO和LPLO/Ap...