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2005年12月第15卷第6期中国比较医学杂志CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEDecember，2005Vo1．15No．6、口、、e；g研究报告$盼es混合性高甘油三酯／高胆固醇血症小鼠模型的培育周淑佩，张晓红，刘国庆，田枫(北京大学医学部实验动物科学部，北京100083)【摘要】目的通过脂蛋白脂酶(1ipoproteinlipase，LPL)~因敲除极度高甘油三酯血症小鼠LPLO与ApoE基因敲除高胆固醇血症小鼠ApoEO杂交，产生混合性高甘油三酯／高胆固醇血症小鼠模型LPLO／ApoEO。方法采用杂交、回交、互交的方法进行培育，并以重组腺病毒为载体在初生小鼠四肢肌肉内表达LPL基因有益突变体LPL447，救治出生2d内即死亡LPLO／ApoEO纯合子初生小鼠。采用从LPLO／ApoEO小鼠的个体组织(鼠尾)中提取基因组DNA进行PCR分析和血浆脂质检测个体基因型。结果LPL基因有益突变体在纯合子小鼠体内短暂表达，能够成功救治LPLO／ApoEO双基因敲除小鼠。成年小鼠表现为极度的混合性高脂血症，其血浆甘油三酯和胆固醇水平分别是正常小鼠的76和14倍。结论成功培育了LPLO／ApoEO双基因敲除的遗传性混合性高甘油三酯、高胆固醇血症小鼠模型。【关键词】脂蛋白脂酶；载脂蛋白E类；双基因敲除小鼠；繁殖【中图分类号】Q95—331【文献标识码】A【文章编号】1671—7856(2005)06—0368—04DevelopmentofCombinedHypercholesterolemic／HypertriglyceridemicMouseModelZHOUShu—pei．ZHANGXiao—hong2，LIUGuo—qing，T1ANFeng(1．TheDepartmentofLaboratou,AnimalScience，HealthScienceCenter，PekingUniversity，Beijing100083，China2．InstituteofCardiovascularScience，HealthScienceCenter，PekingUniversity，Beijing100083，China)【Abstract】ObjectiveToestablishacombinedhypercholester0lemic／hypertriglyceridemicnlousemodelbycross—breedingofIJLandApoEknockoutmice．MethodsThemodelwasdevelopedbycrossbred，backcrossandintercrossofthe2linesofknockoutmice．andrescuedh、muscularexpressionofaIJLbeneficialmutantinhomozygousneonates．ThegenotypewasdeterminedbyPCRandconfirmedbybloodlipidassay．ResultsTheIJPLandApoEdoubleknockoutmicecouldberescuedbymuscularexpressionofLPL．PlasmaTGandTClevelsinadultLPLO／ApoEOmicewereincreased76and14fold．respectively．comparedwithwild—typelittermates．Conclusionhyperchokster0lemic／hypertriglyceridemicmousemodelhasbeendevelopedsuccessfully．【Keywords】Lipoproteinlipase；ApolipoproteinsE；Doubleknockoutmice；Breeding大量新近的临床研究资料表明，高甘油三酯血症(TG)是冠心病(CHD)的独立危险因素，并伴有促动脉硬化斑块破裂的危险。脂蛋白脂酶(LPL)是机体水解甘油三酯的限速酶，在脂质代谢中起着[基金项目】自然科学基金(30270539)。[作者简介]周淑佩(1963一)，女，副研究员，研究方向：实验动物管理及模型动物保种。重要作用。为了深入研究TG与CHD的关系，适当的动物模型是必不可少的。去基因小鼠是进行类似研究的最佳选择。然而敲除LPL基因的纯合子小鼠在出生后48h内全部死亡，不能开展进一步研究。我们通过体细胞LPL基因有益突变体LPL447基因转移方法，成功救治LPL基因敲除纯合子小鼠，制备了极度高甘油三酯血症小鼠模型。为了研维普资讯http://www.cqvip.com中国比较医学杂志2005年12月第15卷第6期ChinJCompMed，December2005，Vo1．15No．6369究这种小鼠对动脉粥样硬化的易感性，我们又将其与高胆固醇血症、自发性动脉粥样硬化的ApoE基因敲除小鼠交配，以期产生混合性高胆固醇，高甘油三酯血症小鼠模型，用于深入的实验研究。[3-831方法1．1培育方法本实验所用c57BL／6J遗传背景的脂蛋白脂酶基因敲除小鼠LPLO自加拿大引进，ApoEO小鼠自美国Jackson实验室引进。雄性LPLO小鼠与相同遗传背景的雌性ApoEO小鼠杂交，产生的F1代雄性小鼠与雌性ApoEO小鼠回交，在其F2代中筛选出基因型为LPL(+／-)／ApoEO的雄性、雌性小鼠，再进行互交。根据孟德尔遗传定律，其F3代中将会产生50％的LPL(+／．)／ApoEO，以及各25％的LPL(+／+)，ApoEO和LPLO／Ap...