甘油得检测方法汇总在发酵行业中,甘油作为底物,就是发酵液中生物合成得直接前体,会影响外源蛋白得启动表达效率,其含量得高低直接影响产物得发酵单位,就是决定菌种取舍得重要指标,就是提高工程菌得发酵密度,提高产品生产率得关键。在生物柴油生产中,它就是副产物,其含量直接影响生物柴油得使用性能,就是衡量生物柴油产品品质得重要指标之一。此外,甘油能与水结合以防止红细胞得冷冻损伤,能延长红细胞得保存期,被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。由于甘油用途很广,因此其含量得测定具有非常重要得意义。目前国内外甘油含量得测定方法较多,主要有高碘酸氧化法、Cu2 + 络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。下面将对其进行简要概述:一、高碘酸法1、原理:高碘酸氧化法就是目前常见用于甘油含量检测得方法,利用高碘酸与甘油发生氧化还原反应,剩余高碘酸及反应生成得碘酸与碘化钾反应生成碘,再用硫代硫酸钠进行滴定,根据消耗得硫代硫酸钠得量来计算甘油得含量。2、操作步骤准确发酵液 10ml 于 100mL 小烧杯中,加少量水溶解,然后转移至 100mL 容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀,静置。用移液管准确移取 10mL 上述溶液于碘量瓶中,加入 20mL 高碘酸钠溶液,混合均匀后,于黑暗中避光静置 40min,然后加入碘化钾溶液与 20%盐酸溶液各 15mL,调节 pH 值在0、8～1、0 之间,然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定,近终点时,加入 2mL 淀粉指示剂溶液,继续滴定至溶液蓝色消逝。同时做试样空白。3、计算:式中:w——样品中甘油得含量,％;V1——空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液得体积,mL;V2——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液得体积,mL;C——硫代硫酸钠标准溶液得浓度,mol／L;M——甘油相对分子质量;二、酶比色法1、原理:它就是利用酶得特异性催化反应建立得测定甘油得一种酶学方法,就是指甘油在甘油激酶作用下转化为 3-磷酸甘油,后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮与过氧化氢,然后过氧化氢与 4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在 500 nm 左右有特征吸收峰得醌亚胺,通过颜色深浅即吸光度得变化测定所生成得 H2O2,甘油得含量与生成得 H2O2成正比,这样用比色法就可以测定甘油得含量。2、操作步骤波长:500nm (480~520nm) 反映温度:37℃ 比色杯光径:1cm 取一定量 R1(参瞧 R2 瓶签)加入 1 瓶 R2 中,溶解后即为工作液,工作液预先保温至测试温度。空白...
