实验六__双波长分光光度法测定 (1)VIP免费

实验六双波长分光光度法测实验六双波长分光光度法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲噁定复方磺胺甲唑片中磺胺甲噁恶唑的含量恶唑的含量一、实验目的1．掌握双波长分光光度法测定原理。2．学习双波长分光光度法在复方制剂分析中的应用。复方磺胺甲唑片的处方为：噁复方磺胺甲唑片的处方为：噁磺胺甲唑（噁磺胺甲唑（噁SMZSMZ））400g400g甲氧苄啶（甲氧苄啶（TMPTMP））80g80g制成制成10001000片片每片含每片含SMZSMZ：：360~440mg(Chp2000)360~440mg(Chp2000)二、基本原理当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。然后根据ΔA值计算b的含量。磺胺甲唑（噁SMZ）在257nm波长处有最大吸收；甲氧苄啶（TMP）在此波长吸收最小并在304nm波长附近有一等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定波长（λ2），在304nm波长附近选择参比波长（λ1）。A257＝AS，257＋AT,257A304＝AS，304＋AT,304ΔA＝A257－A304A∵T,257＝AT,304＝AS，257－AS，304＝ΔECSMZlΔA与CSMZ有线性关系。在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液与SMZ对照品溶液的吸收度，求出供试品溶液吸收度差值(ΔAx)、SMZ对照品溶液的吸收度差值(ΔAs)，计算，即得。ssxxsxsxCAACCCAA每片中含SMZ的毫克数1000100称WWAACmsxsSMZCs=0.505mg/mlW称=0.06960gW=552.64mg由于参比波长对测定影响较大，故采用对照品溶液来确定。此波长可因仪器不同而异，测定时应仔细选择。三、实验内容1、供试品溶液的制备（教师准备）取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲唑噁50mg与甲氧苄啶10mg)，置于100mL量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度，噁摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。二、对照品溶液的制备（教师准备）精密称取在105℃干燥至恒重的磺胺甲唑对照品噁50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分别置于100mL瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。三、磺胺甲唑的测定噁精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)，(2)各2mL，分别置于100mL量瓶中，各加0.4％氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。取对照品溶液取对照品溶液(2)(2)的稀释液，以的稀释液，以257257nmnm为测定波长（为测定波长（λλ22），），在在304304nmnm波波长附近长附近((每间隔每间隔0.50.5nm)nm)选择等吸收点波选择等吸收点波长为参比波长长为参比波长((λλ11))，，要求要求ΔAΔA＝＝AAλ2λ2－－AAλ1λ1＝＝00。。再在再在λλ22与与λλ11两波长处分别测定供试品两波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液溶液的稀释液与对照品溶液(1)(1)稀释稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值液的吸收度，求出各自的吸收度差值((ΔA)ΔA)，，计算，即得。计算，即得。四、操作注意事项测定之前应先检查仪器波长是否准确。五、思考题1．双波长分光光度法测定复方制剂有何优点?2．应用双波长分光光度法应如何选择测定波长和参比波长?