2008~-第4期医药化工31略谈透明质酸的降解方法王学平透明质酸(HA)，又名玻璃酸，为体内重要的生理活性物质。HA在不同的代谢阶段，因其相对分子质量(Mr)的不同而产生不同的生物活性，低MrHA(LMWrtA)就具有高MrHA没有的某些生物活性，甚至两者有完全相反的作用。低分子量的HA易吸收，在体内可重新合成高分子HA，增加内源性HA的含量，可发挥保健和美容养颜的功效。目前发酵法和从动物组织中提取的HA相对分子质量较大(100万以上)，作为功能因子添加在食品中的HA需要降解。HA降解的方法有多种，本文对各种方法进行了简单介绍。1透明质酸的降解方法LMWHA的制备方法有物理方法、透明质酸酶(hyaluronidase，HAas)酶解法、化学降解法等。1．1物理法江南大学食品科学与安全教育部重点实验室的覃彩凤等I隧择了超声波法降解HA，考察了不同的超声波强度和超声时间对HA进行降解的情况。从结果可以看到，超声波的确可以降低HA的分子量，而且在开始阶段分子量下降的速度快，随着时间的延长，下降的速度减慢。Mason&Lorimer曾报道机械力导致大分子链从中间断裂，分子越大，分子量下降就越快，当分子量降到一定的界限时，这种降解将不再发生。这正好和覃彩凤等的研究结果一致。1．2化学法覃彩凤等选择了3个常用的氧化降解体系：(1)过氧化氢+铜离子体系；(2)过氧化氢+Vc+琥珀酸体系；(3)次氯酸钠体系。从对HA的降解结果来看，3个体系都能有效降低HA的分子量，使HA的分子量从起始的102万下降到只有几千道尔顿，而且分子量下降的速度都很快。表1的研究结果表明，抗坏血酸对于HA的降解是必需的，琥珀酸对HA的降解影响不大。表1l、vc和琥珀酸不同条件降解HA的结果比较考虑到食品添加剂生产的安全性问题，尽量避免采用有毒化学试剂和重金属，所以重点考察过氧化氢+Vc+琥珀酸体系，为简化反应体系，覃彩凤等考察了抗坏血酸和琥珀酸的降解HA的效果。确定最佳的氧化降解条件为过氧化氢和抗坏血酸摩尔比为2：1，pH值维持在4．0，温度控制在55cI=，过氧化氢和抗坏<<<<<<<<<<<<<<<<<《<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<图谱初步研究叨．中成药，2007，29(5)：730-733[41】程伟，梅洁，肖玉秀．连钱草药材的高效毛细管电泳指纹图[36】张晓霞，周卯星．气相色谱法测定蛇床子提取物中蛇床子素谱研究叨．氨基酸和生物资源，2006，28(2)：7-11的含量田．时珍国医国药，2006，17(8)：1384-1385[42】汪洋，潘细贵，阮晓琪．等．高效毛细管电泳法测定消炎抗菌[37]t方敏，毛秀红，季申．气相色谱法测定千年健中芳樟醇的含片中黄芩苷含量叨．中国实验方剂学杂志，2007，13(1)：8-9量叨．中成药，2006，28(7)：1019-1020[43】赵燕，杨兴斌．高效毛细管区带电泳法分析南瓜多糖的单糖【38】刘吉金，王晓炜．气相色谱法测定菊花挥发油中桉油精、樟组成【J】．中国现代应用药学杂志，2006,23(4)：323-326脑、龙脑、醋酸龙脑酯叨．中草药，2006，37(9)：1352-1353李伟，柴金玲，阿里木江．区带毛细管电泳分离测定大黄提取【39]张静资，张利．气相色谱法测定蒺藜提取物中的有机残留量液中游离蒽醌化合物叨．分析科学学报,20O6，22(1)：68-70叨．西北药学杂志,2006，21(5)：201-203[45】刘玉红，刘玉国．高效毛细管电泳法测定黄连中盐酸小檗碱f40]向增旭，赵维佳，郭巧生．金银花中18种有机磷农药残留量的含量叨．中国现代应用药学杂志,2007，24(2)：140-141分析方法的研究田．中国中药杂志，2006，31(16)：1321—1323维普资讯http://www.cqvip.com32医药化工血酸的最佳浓度分别为0．4mmol／gHA和0．2mmol／gHA，降解时间15min。在此条件下．HA降解后的分子量为45．7kDa。1．3酶法闼生物大分子的酶法水解由于其专一性强、反应条件温和没有副产物，常被人们首选用于大分子的降解。由于透明质酸酶和硫酸软骨素酶的来源非常有限，价格昂贵，在很大程度上限制了它们的应用。覃彩凤等尝试选择了几种与HA的结构非常相似的多糖水解酶，考察它『1]是否具有降解HA的作用。研究结果表明，果胶酶、纤维素酶和溶菌酶3种酶的专一性均较高，对HA的水解效果均不好。透明质酸酶是对催化降解透明质酸酶的...
