肉鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验_王傲雪 (1)VIP专享VIP免费

肉鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验王傲雪１，２，张凌云２，张桉潮３，李昆鹏２．４，张秀丽２，梁晚枫１，张林波２（１．延边大学，吉林延吉１３３０００；２．吉林农业大学，吉林长春１３０１１８；３．吉林正大实业有限公司，吉林长春１３００３３；４．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京１００１９３）摘要：为了解吉林省某地鸡源性沙门氏菌的感染及耐药情况，对该地７个肉鸡场１５０份病鸡组织样品进行细菌分离，并进行了血凝试验、致病性试验和药敏试验。分离得到２６株沙门氏菌，经血凝鉴定有１９株呈阳性，其中５株呈强阳性并均能使雏鸡致死。药敏试验结果显示，该５株沙门氏菌对头孢噻肟较为敏感；对氨苄西林、替米考星、林可霉素、阿奇霉素和头孢拉定表现出极高的耐药性，耐药率高达１００％；诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、强力霉素和氯霉素５种临床用药与痢菌净不具有协同或累加作用。试验结果表明，沙门氏菌是危害该地肉鸡养殖场的主要病原菌之一，且耐药性十分严重。关键词：沙门氏菌；分离鉴定；药敏试验中图分类号：Ｓ８５２．６１＋４文献标识码：Ａ文章编号：１６７１－７２３６（２０１３）０７－０１６７－０４禽沙门氏菌病（ａｖｉａｎｓａｌｍｏｎａｌｌｏｓｉｓ）是由１种或多种沙门氏菌引起的禽类急性或慢性传染病的总称，已被国际兽疫局列为Ｂ类传染病（廖成水等，２０１０）。沙门氏菌是影响食品安全的致病菌之一，广泛存在于自然界和温血动物体内，是一种重要的人兽共患性病原菌。随着中国集约化养鸡业的发展，病毒性传染病依靠良好的疫苗和完善的免疫程序基本得到控制，而细菌性传染病日趋严重，难以防制，使得极易形成耐药性的沙门氏菌的流行愈演愈烈（申之义等，２００１）。虽然抗生素的应用对控制和预防沙门氏菌病发挥了巨大的作用，然而随着抗菌药物的滥用及不当使用，沙门氏菌病的耐药性日趋严重，加强对该菌耐药性的监测力度和耐药机制的研究迫在眉睫（邓树轩等，２００７）。鉴于此，作者对吉林省某地鸡源沙门氏菌病进行了病原菌的分离、鉴定及药敏试验，为临床兽医选择和使用抗菌药物提供参考。１材料与方法１．１材料１．１．１病料来源２０１０年４月—２０１０年５月收集的１５０份来自吉林省某地７个规模鸡场疑似患沙门氏菌病的病料。１．１．２培养基ＨＥ营养琼脂培养基、ＳＳ营养琼脂培养基和三糖铁琼脂（ＴＳＩ）均购自青岛某技术有收稿日期：２０１２－１２－２５作者简介：王傲雪（１９８６－），女，吉林人，硕士生，研究方向：鸡病研究与防治。通信作者：张林波（１９７３－），男，吉林人，博士生导师，教授，从事免疫学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｃｚｌｂ＠１６３．ｃｏｍ限公司。１．１．３沙门氏菌属诊断血清沙门氏菌Ａ～Ｆ群“Ｏ”多价诊断血清购于中国生物技术集团公司兰州生物制品研究所，批号：２０１００１０１。１．１．４试验药物头孢噻肟、头孢唑啉、头孢拉定、庆大霉素、恩诺沙星、强力霉素、奥复星和卡那霉素８种药敏纸片均购自杭州微生物试剂有限公司，批号１０１２２３；硫酸庆大霉素、阿莫西林、头孢曲松、诺氟沙星、痢菌净、阿米卡星、泰勒菌素、阿奇霉素、壮观霉素、新霉素、左旋氧氟沙星、林可霉素、呋喃唑酮、泰妙菌素、替米考星、复方新诺明、沙拉沙星、磷霉素、黏杆菌素、青霉素、氯霉素、阿奇霉素、甲硝唑、环丙沙星、氨苄西林、左旋氧氟沙星及培氟沙星２７种药敏纸片按ＷＳ／Ｔ１２５－１９９９纸片法抗菌药物敏感试验标准生物制药实验室自制，密封低温保存备用；青霉素钾购自江苏南农高科动物药业有限公司。１．１．５试验动物１日龄健康ＡＡ＋雏鸡由德惠市种鸡场提供。１．２方法１．２．１病料采集病料来源于发病地区，病鸡临床症状表现为精神萎顿，畏寒不愿走动，同时腹泻排白色浆糊状稀便，泄殖腔周围羽毛污染，将其处死并剖检取其肺脏、心脏、肝脏、脾脏和肠，于－２０℃保存备用。１．２．２沙门氏菌的分离鉴定在实验室无菌条件下将病料组织划线接种于ＨＥ营养琼脂培养基和ＳＳ营养琼脂培养基，置３７℃培养１８～２０ｈ后观察，挑取直径约０．５ｍｍ的小菌落进行革兰氏染色，革兰氏阴性、大...