罗氏应用科学部/分子诊断部rLightCycler?480实时荧光定量PCR系统操作快速指南V2.0说明及版本历史1.基本界面及图标1.1.Overview界面1.2.NewExperiment界面1.3.Navigator界面2.PCR及结果分析2.1.开机2.2.运行一次PCR实验2.2.1.PCR程序的设定2.2.2.样本的编辑2.2.3.程序的运行2.3.实验结果的分析2.3.1.绝对定量分析2.3.2.相对定量分析2.3.3.基因分型分析2.3.4.Tmcalling2.4.结果报告3.数据管理及模块化操作3.1.历史数据的处理3.2.应用Template和Macros简化实验流程4.用户管理5.日常维护6.Troubleshooting本指南用于本指南用于简要说明简要说明LightCycler?480系统软件系统软件的界面及操作要点的界面及操作要点的界面及操作要点,,对初学者了解系统软件有所帮助统软件有所帮助。。但荧光定量PCR是一个相对较为复杂和精确的定量方法是一个相对较为复杂和精确的定量方法,,要求使用者对仪器仪器、、软件和实验设计有比较系统深入的了解软件和实验设计有比较系统深入的了解,,方能对方能对实验的设计实验的设计实验的设计、、操作及分析运用自如操作及分析运用自如。。因此请各位使用者在初步了解本软件的操作要点后因此请各位使用者在初步了解本软件的操作要点后,,尽快通过完整的操作手册尽快通过完整的操作手册,,熟悉系统相关软件和实验设计关软件和实验设计、、分析分析。。版本历史版本号修订时间1.02007-3-272.02007-8-22第一部分基本基本界面及界面及界面及图标图标概述概述::一、Overview界面Exit:关闭LC480软件Logoff:从目前使用的数据库中退出并可登陆其他的数据库Overview:点击该图标进入点击该图标进入““Overview”界面Navigator:点击该图标进入点击该图标进入““Navigator”界面界面,,可进行数据的导入导出等操作可进行数据的导入导出等操作,,详见详见。。。。。。。Save:点击该图标进行保存Export:导出当前打开的文件Close:关闭当前打开的文件Print:打印当前打开的窗口Tools:打开打开““Tools”界面界面,,可进行密码修改可进行密码修改,,建立和编辑用户建立和编辑用户,,系统设置系统设置,,查看数据库状态数据库状态、、仪器状态仪器状态、、滤光片组合等操作Help:查看软件版本查看软件版本,,操作说明书等二、NewExperiment界面SummaryModule:查看实验的总体概况查看实验的总体概况,,包括实验名称包括实验名称,,所用的程序所用的程序,,检测模式检测模式,,滤光片组合等滤光片组合等。。概况的内容由系统自动生成RunModule:编辑编辑、、运行或查看PCR程序及查看PCR实时数据SubsetEditor:点击该模块后可进行子集的编辑SampleEditor:点击后进行样品信息的编辑AnalysisModule:点击进行结果分析或查看已保存的分析结果ReportModule:选择需要的内容以报告的形式给出结果三、Navigator界面Import:导入一个文件Export:导出一个文件BatchImport:导入一批数据BatchExport:导出一批数据New:新建一个实验或文新建一个实验或文件夹件夹NewFolder:新建一个文件夹Open:打开一个文件Rename:重命名Delete:删除选中的目标Copy:拷贝选中的目标Note:所有上述图标在深蓝色时为激活状态所有上述图标在深蓝色时为激活状态,,灰色时为灭活状态也就是不可用状态灰色时为灭活状态也就是不可用状态。。各图标的功能在不同状态下以颜色来区分是否具备标的功能在不同状态下以颜色来区分是否具备。。第二部分PCR及结果分析一、开机(一打开LightCycler480仪器(二打开电脑(三登陆WindowsXP(四双击图标,打开LightCycler480软件,输入用户名、密码后登陆。Note:打开480仪器后,将有一个仪器自动初始化的过程:SampleLoader自动出来一次,并复位。二、运行一次PCR实验(一PCR程序的设定1、打开软件后,自动进入如下界面2、点击软件主界面中的“NewExperiment”,进入程序设定界面3、根据实验所用的检测模式选择“DetectionFormat”,“BlockType”,“PlateID,(optional”和“ReactionVolume”3.1从DetectionFormat的下拉框中选择分析模式:SYBRGreenI;SimpleProbe;MonoColorHydrolysisProbe;MultiColorHydrolysisProbe;MonoColorHybProbe;MultiColorHybProbe3.2‘Customizes’模块中选择合适的滤片组合3.3选择合适的模块3.4...
