论著文章编号:100025404(2004)1821658203透明质酸对体外培养半月板纤维软骨细胞的影响潘险峰1,林月秋2,张正治1,汤逊2,徐永清2,李主一2(1第三军医大学高原军事医学系中心实验室,重庆400038;2成都军区昆明总医院骨科,昆明650032)提要:目的观察体外培养半月板纤维软骨细胞的生长特点及生物学特性,研究中分子量透明质酸(hyaluronicacid,HA)对体外培养半月板纤维软骨细胞的影响。方法机械分离和胰酶、胶原酶联合消化,将兔半月板纤维软骨细胞进行体外分离培养,动态观察细胞形态变化和生长情况。设立对照,观察中分子量透明质酸HA(分子量2×106)对细胞生长增殖的影响,利用同位素标记技术,测定细胞对培养基中3H2TdR、3H2Pro和Na35SO4的摄取量,比较细胞DNA、胶原蛋白和蛋白多糖合成的速度。结果体外培养的半月板细胞呈多角形、有突起、富含分泌颗粒。当培养基中加入HA后,细胞3H2TdR、3H2Pro和Na35SO4的摄取量不同程度高于对照组,统计学相差显著(P<0105)。结论中分子量透明质酸能促进体外培养半月板纤维软骨细胞增殖和细胞外基质合成。关键词:透明质酸;半月板;纤维软骨细胞;同位素掺入;体外培养中图法分类号:R322.72;R329.24;R914.3文献标识码:AEffectsofhyaluronicacidonmeniscalfibrochondrocytesculturedinvitroPANXian2feng1,LINYue2qiu2,ZHANGZheng2zhi1,TANGXun2,XUYong2qing2,LIZhu2yi2(1CentralLaboratory,ThirdMili2taryUniversity,Chongqing400038;2DepartmentofOrthopaedics,KunmingGeneralHospital,ChengduMilitaryAreaCommand,Kunming650032,China)Abstract:ObjectiveToobservethegrowthcharacteristicsandbiologicalpropertiesofmeniscalfibrochondro2cytesculturedinvitroandtostudytheeffectsofmoderate2molecular2weighthyaluronicacid(HA)ontheculturedmeniscalfibrochondrocytes.MethodsTherabbitmeniscalfibrochondrocyteswereisolatedmechanicallyanddigest2edwithtrypsinandtypeⅡcollagenaseforthecultureinvitro.Themorphologicalchangesandgrowthcharacteristicsofthecellswereobserved.Acontrolgroupwasemployed.Afterthehyaluronicacid(molecularweight:2×106)andvehiclewereputintothecellculturemedium,thecellgrowthwasobserved,andtheingestionof3H2TdR,3H2Pro,andNa235SO4wasmeasuredusingisotope2labelingtechnique.TheincorporationratesofDNA,collagen,andproteo2glycanwerecompared.ResultsThemeniscalcellsculturedinvitroweremulti2angled,hadwithprocesses,andcontainedmanysecretorygranules.AftertreatmentwithHA,theincorporationratesof3H2TdR,3H2Pro,andNa235SO4werehigherthanthoseinthecontrolgroup(P<0.05).ConclusionModerate2molecular2weightHAcanpro2motethecellproliferationandthesynthesisofextracellularmatrixofthemeniscalfibrochondrocytesculturedinvitro.Keywords:hyaluronicacid;meniscus;fibrocartilagecell;isotopeincorporation;cultureinvitro半月板损伤后愈合困难,尤其是少血供的游离缘部分,临床多采用切除整个半月板的方法,这往往带来很多后遗症。过去认为半月板纤维软骨细胞为分化终末细胞,损伤后难以自行修复,现在认为半月板纤维软骨细胞,在一定条件下也能分裂增殖。作者简介:潘险峰(1968-),男,云南省昆明市人,博士,主治医师,主要从事骨与关节损伤方面的研究。电话:(023)68752345收稿日期:2003202203;修回日期:2003209211透明质酸(hyaluronicacid,HA)是近年研究较多的氨基糖类,在促进创伤愈合(woundhealing)方面,有其独特作用。已经发现胎儿创伤愈合的速度和质量明显高于成人,其原因之一是胎儿组织富含HA1,HA能创造一个有利于伤口愈合的细胞微环境。本实验通过观察中分子量HA对培养半月板纤维软骨细胞的影响,探讨外源性HA对半月板损伤后修复的作用机制。8561第26卷第18期2004年9月第三军医大学学报ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAEVol.26,No.18Sep.20041材料和方法111材料1.1.1动物日本大耳白兔1只雄性,体质量1.5kg(普通级,昆明市中心血站,滇实动证字9720号)。1.1.2试剂DMEM培养液(Gibco公司),D2Hanks液(Gibco...
