·488·临床军医杂志(ClinJMedOfic)2008年8月第36卷第4期胰蛋白酶在胰腺癌疼痛中的作用陆智杰，昊飞翔，缪雪蓉，俞卫锋(解放军第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科，上海200438)摘要：目的观察胰腺癌疼痛患者的胰腺肿瘤标本内胰蛋白酶的mRNA及其蛋白的表达。方法取视觉模拟疼痛评分(VAS)在5分以上的胰腺肿瘤患者的新鲜组织标本，采用RT—PCR及ELISA的方法对胰蛋白酶的mRNA及其蛋白的表达进行检测。结果胰腺癌组织中人胰蛋白酶mRNA水平明显高于正常胰腺组织，ELISA显示胰腺癌组织的胰蛋白酶水平明显增高，与正常胰腺组织相比，差异具有统计学意义(P<0．05)。结论高水平的胰蛋白酶可能通过激活PAR-2介导胰腺癌疼痛的。关键词：胰蛋白酶；胰腺肿瘤；疼痛；蛋白酶活化受体-2中图分类号：R735．9文献标志码：A文章编号：1671-3826(2008)04-0488-03EffectofTrypsinonPainofPancreaticCarcinomaLuZhi—jie，WuFei—xiang，MiaoXue—rong，YuWei—feng(DepartmentofAnesthesiology，EasternHepatobiliarySurgeryHospitalofSecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200438，China)Abstract：ObjectiveTostudythetrypsinexpressioninpancreatictumorspecimenfrompancreaticcarcinomapatientswithpain．MethodsRT—PCRandELISAwereusedtoidentifytrypsinmRNAanditsexpressioninfreshtissuespecimenfromthepancreaticcarcinomapatientswithVAS(visualachesimulation)scoreI>5．ResultsThemRNAlevelwassignificandyhigherinpancreaticcarcinomatissuethaninnomalpancreatictissue．AndoutcomeofELISAshowedtrypsinlevelofpancreaticcarcinomatissuesignifi—candyincreasedcomparedwiththatofnomalpancreatictissue(P<0．05)．ConclusionHighexpressionoftrypsinisfoundinpancreaticcarcinomapatientswithpain，whichmaymediatenociceptionbyactivationofprotease—activatedreceptor一2inprimarysensoryneurons·Keywords：trypsin；pancreaticcarcinoma；pain；protease—activatedreceptor-21991-2000年来，中国胰腺癌病死率水平在不断上升，65岁以上人群尤为明显⋯。胰腺癌患者发生疼痛极为常见，胰腺癌患者的疼痛发生率及其严重程度与肿瘤程度相关，约30％一60％病灶相对局限的早期胰腺癌患者和逾80％的进展期胰腺癌患者有癌痛体验，患者死亡前的癌痛发生率更高达90％。胰蛋白酶(Trypsin)为蛋白酶的一种，在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其他酶的前体，起活化作用。胰蛋白酶还可激活蛋白酶活化受体-2(protease．activatedreceptor，PAR-2)，近年来，发现蛋白酶活化受体-2可能介导胰腺炎的疼痛，给清醒大鼠胰管内注入胰蛋白酶和PAR-2特异性肽激动剂均可以引起疼痛行为反应。在胰腺炎症时，胰腺组织胰蛋白酶可激活PAR-2，在胰腺癌发生时，是否同样具有蛋白酶的高表达呢?为此，我们选取东方肝胆外科医院确诊的胰腺癌病例，视觉模拟疼痛评分(VAS)在5分以上的胰腺肿瘤患者的新鲜组织标本，对胰蛋白酶的mRNA及其蛋白的表达进行检测，以验证胰蛋白酶是否高表达，并激活PAR．2引起胰腺癌疼痛。1材料与方法1．1实验材料选取人胰腺癌患者的肿瘤新鲜组织。人胰蛋白酶ELISA试剂盒为武汉中美科技有限公司产品。考马斯亮蓝试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。RT—PCR试剂盒为德国Qiagen公司产品。Tag酶为美国BioLabs公司产品。1．2标本的选取及分组分为两组，实验组10例为胰腺癌组，视觉模拟疼痛评分(VAS)在5分以上；对照组10例为正常胰腺组织组。收稿日期：2008-03-21基金项目：本课题受上海市科委基金资助(074119609)作者简介：陆智杰(1974．)，男．上海人，主治医师，医学硕士(通讯作者：俞卫锋教授，博士生导师．E—mail：ywf808@sohu．corn)。维普资讯http://www.cqvip.com第4期胰蛋白酶在胰腺癌疼痛中的作用陆智杰，等·489·1．3R'lZ．PCR方法检测人胰蛋白酶mRNA的表达人胰蛋白酶基因序列(NM-002771．2)由Genebank获得，据其序列特点，设...
