179第14卷第7期2012年7月辽宁中医药大学学报JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCMVol.14No.7Jul.,2012益母草具有活血调经、利尿消肿、祛瘀生新的作用,可以调补胎产妇女诸多虚证,其对妇科肿瘤、肝癌、胰腺癌、白血病等都有较好疗效[1]。现代研究证明中波紫外线(UVB)对角质形成细胞有损伤作用,且与照射剂量相关,益母草对角质形成细胞具有光保护作用,抑制TNF-α的释放和减少细胞凋亡可能是其保护作用机制之一[2]。因此,益母草是良好的自由基清除剂,具有防止脂质过氧化、保护生物膜完整性、维持细胞功能的作用。本文探讨紫外线照射后,益母草对光老化皮肤组织中Bax/Bcl-2蛋白的调控作用。1实验材料1.1实验药物益母草赋形剂。1.2实验动物SPF级小鼠,46日龄,体重18.0~22.0g,由沈阳医科大学实验动物中心提供。1.3主要试剂心钠素抗体,LOTNo:2040R;血小板源性生长因子-A抗体(Anti-PDGF-A),LOTNo:0196R;蛋白激酶C抗体(Anti-phospho-PKC),LOTNo:2505R;bcl-2抗体,LOTNo:0032R;bax抗体,LOTNo:0127R;caspase-3抗体,LOTNo:0081R,均购自北京博奥森生物科技有限公司;Sp试剂盒购自北京博奥森生物科技有限公司;DAB显色试剂盒购自北京博奥森生物科技有限公司。1.4主要仪器紫外线灯:上海长兴机械厂,功率分别为20、40W;紫外线强度检测仪:上海宝山顾村电光仪器厂;二氧化碳培养箱:美国Thermo生产,3111型;生物显微镜:日本奥林巴斯生产,CHA型;酶标仪:益母草对光老化皮肤组织中bax/bcl-2表达的影响徐蓉,吴景东(辽宁中医药大学,辽宁沈阳110847)摘要:目的:探讨bax/bcl-2基因在益母草作用后的光老化皮肤组织中的表达特点,研究益母草在修复皮肤光老化中的可能作用。方法:用长波紫外线和中波紫外线联合照射小鼠背部皮肤,建立皮肤光老化的实验动物模型。于紫外线光照后的间歇,在紫外线照射区域的皮肤上外涂益母草赋形剂。采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果:紫外线照射后,Bax表达上调,Bcl-2表达下调,促进细胞凋亡;益母草干预后,这一趋势有所缓解。结论:益母草可能通过调控Bax/Bcl-2蛋白的表达来减少细胞凋亡。关键词:益母草;皮肤光老化;凋亡;bax;bcl-2中图分类号:R275.9文献标识码:A文章编号:1673-842X(2012)07-0179-03收稿日期:2012-01-07作者简介:徐蓉(1979-),女,吉林长春人,医师,博士研究生,研究方向:中医美容基础理论研究。通讯作者:吴景东(1962-),男,辽宁人,教授,博士研究生导师,研究方向:损美性皮肤病临床治疗与实验研究及皮肤衰老与抗衰老研究。E-mail:lnzywjd0719@163.com。ExpressionofBaxandBcl-2inRatSkinPhotoagingandLeonurusJaponicusHoutt(LSH)'sInfluenceXURong,WUJing-dong(LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang110847,Liaoning,China)Abstract:Objective:ToinvestigatetheexpressiontraitofBax/Bcl-2intheskinphotoagingwhichinterferedbyLHS.AndtherepairandprotectionofLHSeffectdtoskinphotoaging.Methods:TotakehighdosesofUVBandUVAradiationashort-termjointapproachtoestablishthemodel.ThezoneofthemodelskinwassmearedwiththeexcipientLSHintheintermissionwhichultravioletradiatedeveryday.Proteinexpressionofapoptosis-relatedgeneBaxandBcl-2wasdetectedbyimmunohistochemicalmethod.Result:BaxexpressionincreasedandBcl-2expressiondecreasedinratskinafterUVAandUVBirradiation.Sothatitpromotesapoptosisofcellsinjuredbyultraviolet.ThistrendiscatabaticafterLHSinterfered.Conclusions:Possibility,LHScanregulatetheexpressionofBaxandBcl-2todecreasetheapoptosisofcells.Keywords:LeonurusjaponicusHoutt(LSH);skinphotoaging;apoptosis;bax;Bcl-2180辽宁中医药大学学报14卷奥地利安图仪器设备厂生产,anthos2010型;微量移液器:美国Thermo生产,10~50μL,10~100μL,100~1000μL。2实验方法2.1紫外线照射前准备20W中波紫外线(UVB)灯管2根,40W长波紫外线(UVA)灯管2根,安装于SS-03紫外线光疗仪上,...