特定蛋白的免疫测定及临床意义特定蛋白的免疫测定方法基本原理:免疫沉淀反应免疫透射比浊免疫散射比浊免疫沉淀反应的发展历史1897年,Kraus发现细菌培养液与其相应抗血清混合后出现肉眼可见的沉淀反应1902年Ascoli建立了环状沉淀试验
1905年Bechhold将抗体混溶在明胶中,然后再将相应特异抗原加于其上,抗原抗体的特异结合可在明胶中出现沉淀
1946年Oudin报道了试管单向免疫扩散试验
(1965年Mancini又提出了平板单向免疫扩散试验
)Grabar和Williams在1953年报道了免疫电泳
(对流免疫电泳、火箭免疫电泳和免疫固定电泳)上述为经典免疫沉淀试验发展阶段,测定范围窄(10~100μg/ml)、灵敏度低,繁琐费时,不能自动化
免疫沉淀反应的发展历史1959年,Schultze等报道了透射比浊法(Transmissionturbidimetry)
1967年,Ritchie等报道了散射比浊法(nephelometry)
1977年,Sternberg等进一步发展建立了速率散射比浊法(Ratenephelometry)
免疫比浊测定方法与免疫沉淀方法相比,灵敏度高,重复性好,测定范围宽,已用于临床体液特定蛋白含量的测定,现已有多种自动化检测仪器应用于临床检验,尤其是免疫散射比浊测定
免疫透射比浊基本原理:一定波长光线通过抗原抗体反应混合液时,被其中的免疫复合物(IC)反射或遮挡、吸收而减弱
在一定范围内,透射光被吸收的量与免疫复合物的量呈正比,后者又与相应抗原和抗体的量呈函数关系
抗体量一定,即可从标准曲线获知抗原的量
由于要求抗原抗体复合物的数量足够,并且颗粒要足够大(35~100nm),本法的测定灵敏度和准确度相对较低
缺点:免疫散射比浊基本原理:光线通过检测溶液时,被其中所含的抗原抗体复合物折射而部分偏转,产生散射