外源性透明质酸应用于伤口愈合中的生化分析吕洛冷永成△陈玉林摘要目的:探讨外源性透明质酸(HA)抑制瘢痕形成的作用及其可能机制。方法:健康SD大鼠45只,复制背部创伤模型,随机分成2%HA治疗组(A组)、1%HA治疗组(B组)、PBS对照组(C组),观察创面大体形态,平均愈合时间和残留面积的大小;并测定愈合部位组织蛋白、羟脯氨酸(Hyp)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的含量。结果:(1)3组的平均愈合时间为(15.2±2.0),(14.2±1.6)和(13.4±1.4)d,A、B两组与C组比较有显著性差异(P<0.05)。A、B两组的残留面积与C组比较有显著性差异,3组间比较也有显著性差异(P<0.05)。(2)Hyp和PCⅢ含量的测定:A、B两组Hyp含量的均值低于C组(P<0.01),而PCⅢ的含量却高于C组(P<0.01)。结论:(1)HA通过对细胞的调控作用,可有效地抑制胶原的合成,提高Ⅲ型胶原含量,使创伤愈合过程中瘢痕形成减少。(2)HA在创面愈合中抑制瘢痕形成的生物学作用与其浓度成正比关系。关键词透明质酸;伤口愈合;瘢痕;羟脯氨酸;Ⅲ型前胶原中国图书资料分类法分类号R644.05AbiochemicalstudyinwoundhealingwithexogenoushyaluronicacidLLuo,LengYongcheng,ChenYulin(DepartmentofBurn,ChanghaiHospital,SecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai,200433)AbstractObjective:Toevaluatetheeffectsofhyaluronicacid(HA)ontheinhibitionofscarformationandtheirpossiblemechanisms.Methods:Forty-fivehealthyadultSDratsinadorsalparttraumamodelwererandomlydividedinto2%HAtreated-group(groupA),1%HAtreated-group(groupB),andPBStreated-groupasacontrolgroup(groupC).Theprocessofhealingwasobserved,theremainedwoundareawasmeasured,andmeanwoundhealingtimewascalculated.Furthermore,dynamicanalysisoflocaltissueprotein,HypandPCⅢcontentswasperformed.Results:(1)Theremainedwoundareaofcontrolgroupwasmuchsmallerthanthatintreatedgroup,andthemeanvalueofwoundhealingtimewas(15.2±2.0),(14.2±1.6)and(13.4±1.4)d,respectively.(2)ThecontentsoftissueHypwerestatisticallylow-erinHA-treatedgroups,whilethoseofPCⅢwerestatisticallyhigherascomparedwith.Conclusion:(1)TheexogenoushyaluronancaneffectivelyinhibitcollagensynthesisandelevatetissuePCⅢcontent.Asaresult,thescarformationisdecreased.(2)HAefficacypresentsadose-dependentmanner.Keywordshyaluronicacid;woundhealing;scar;hydroxyproline;procollagentypeⅢa近年来,随着胎儿外科基础研究的发展,细胞外基质成分(ECM)在组织修复过程中对瘢痕形成的调控作用日益受到人们关注。在胎儿伤口愈合过程中,创面基质中高浓度的透明质酸(HA)使得愈合后几乎无瘢痕形成[1]。在成人创面中,HA对组织纤维化形成的影响及其作用机制不十分清楚。本实验通过动物创伤模型,将外源性HA应用于伤口局部,探讨其外源性HA在创面愈合中对胶原代谢的影响及其作用机制。1材料和方法1.1实验动物和试剂健康SD大鼠45只,体质量200～250g,雌雄各半,由南京铁道医学院实验动物中心提供。动物分笼饲养,统一饲料,自由饮食。HA相对分子质量为7.5×105,由人脐带中提取,上海生物制品研究所生产,PCⅢ试剂盒重庆肿瘤研究所生产,L羟脯氨酸(Hyp)上海丽珠东风生物技术有限公司生产,牛血清清蛋白上海生物制品研究所生产。1.2实验方法1.2.1动物创伤模型的制备和分组动物背部剪毛后,涂用硫化钠脱毛,温水多次清洗后拭干。次日用2%的戊巴比妥(40～50mg/kg)腹腔注射麻醉后,常规消毒后铺巾,用利刃在脊柱两侧旁开1cm·85·第二军医大学学报AcadJSecMilMedUniv1998Aug;19(增刊)∶85～87a作者单位第二军医大学长海医院烧伤科,上海,200433;△南京铁道医学院第一附属医院整形科吕洛,男,1962年9月生,博士,主治医师处,切取直径1.8cm的圆形创面,深及深筋膜及部分肌层。止血后备用。伤后2h测定平均面积约2.5cm2。动物随机分成A、B、C3组,每组15只。每只动物2个创面,共90个创面。1.2.2HA溶液的制备和应用HA每次使用前称量,用无菌的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS,0.01mol/L,pH7.0)溶液在超净台内将其配制成2%,1%的HA溶液。应用时,取2cm×2c...
