第49讲微生物的培养与应用考纲要求考情分析命题趋势1．微生物的分离和培养2．某种微生物数量的测定3．培养基对微生物的选择作用2017，全国卷Ⅰ，37T2016，全国卷Ⅰ，39T2016，全国卷Ⅲ，39T2016，四川卷，10T2015，全国卷Ⅰ，39T微生物的分离和培养在新课标高考试卷中出现频率较高，试题主要以非选择题的形式围绕培养基的种类和功能、微生物分离的方法和原理、平板划线法和稀释涂布平板法的比较、透明圈的大小与分解能力或抗菌能力的关系等内容进行命题，试题难度一般不大对微生物的筛选与计数的考查多以非选择题的形式与微生物的分离、培养等内容相结合进行考查分值：12～15分一、微生物的实验室培养1．培养基1)概念：人们按照微生物对__营养物质__的不同需求，配制出供其生长繁殖的__营养基质__。2)成分3)分类2．无菌技术1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。2)关键：__防止外来杂菌的入侵__。3．纯化大肠杆菌以及菌种的保藏1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算→称量→溶化→__灭菌__→__倒平板__。2)纯化大肠杆菌①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成__单个细胞__，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。②方法：__平板划线法__、__稀释涂布平板法__。3)菌种的保藏①短期保存：__固体斜面培养基__上4℃保存，菌种易被污染或产生变异。②长期保存：__甘油瓶__中－20℃在冷冻箱中保藏。二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1．菌种筛选：使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。2．统计菌落数目：常用方法有__稀释涂布平板法__、显微镜直接计数法。3．细菌分离与计数的实验流程土壤取样→配制__培养基__→微生物的培养与观察→细菌的计数。三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶1)组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括__C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶__。2)作用2．菌种筛选1)方法：__刚果红染色法__。2)原理即使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据__是否产生透明圈__来筛选纤维素分解菌。3．筛选流程土壤取样：富含__纤维素__的环境↓选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量↓梯度稀释↓涂布平板：将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上↓挑选产生透明圈的菌落：产生__纤维素酶__的菌落周围出现透明圈1．判断正误，正确的画“√”，错误的画“×”。1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。×)2)培养基分装到培养皿后进行灭菌。×)3)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。×)4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。√)5)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质。√)2．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是B)成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含10102g00．1000量gg．4g065gmLA．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C．该培养基缺少提供生长因子的物质D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用解析从用途看该培养基属于鉴别培养基；蛋白胨可以提供生长因子；该培养基调节合适的pH后经灭菌后才可以接种使用。3．2015·四川卷)下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误的是C)A．探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO2B．用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精C．探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰D．用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板解析探究酵母菌种群数量变化，需定时取样计数，不需设置空白对照，C项错误。一微生物的培养和分离1．培养基的种类、用途及配制原则1)按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂如琼脂)微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏半固体培养基观察微生物的运动、分类、鉴定2)按功能分类种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物...
