第六章蛋白质和DNA技术1．我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分离血清蛋白。请回答下列有关问题：(1)实验前取新鲜血液，静置凝固后会析出淡黄色的液体——血清，其中含有的蛋白质有________、________等。(2)血清蛋白提取和分离的活动程序为：________________________________________________________________________________________________________________________________________________，在染色和脱色步骤中，所用试剂分别为__________________、____________________。(3)能利用电泳技术分离血清蛋白的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：本题考查提取和分离血清蛋白的相关知识。(1)血清中含有两种球蛋白、凝集素等多种蛋白质。(2)血清蛋白的提取和分离步骤为：点样→电泳→染色→脱色→制干胶板，其中染色、脱色所用试剂分别为质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液、体积分数为7%的醋酸溶液。(3)血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在电场中移动，故可用电泳技术进行分离。答案：(1)两种球蛋白凝集素(2)点样→电泳→电泳→染色→脱色→制干胶板质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液体积分数为7%的醋酸溶液(3)血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在电场中移动2．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。(1)将实验流程补充完整：A为________________，B为________________。凝胶色谱法的基本原理是根据________________而达到蛋白质分离的有效方法。(2)洗涤红细胞的目的是去除________，洗涤次数过少，无法除去________；离心速度过高和时间过长会使______________________一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是________________________。释放血红蛋白的过程中起作用的是____________________。(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是____________________________________________________________________________________________________。如果红色区带__________________，说明色谱柱制作成功。答案：(1)血红蛋白的释放样品的加入和洗脱相对分子质量的大小(2)杂蛋白(血浆蛋白)血浆蛋白白细胞和淋巴细胞离心后的上清液中没有黄色蒸馏水和甲苯(3)准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致均匀一致的移动3．下图为细胞内DNA复制过程示意图，该过程在体外也可进行，以获得大量相同的DNA片段，该项技术称之为PCR技术，又称多聚酶链式反应，请分析回答：(1)PCR过程与细胞内DNA复制相比，主要有两点不同：________________________________________________________________________________________________________________________________________________、________________________________________________________________________。(2)PCR技术过程的三个步骤：______、______、________________________________________________________________________。(3)假设PCR过程中，只用一条DNA片段作为模板，请计算30次循环后，反应物中大约有多少个这样的DNA片段？____________。(4)PCR技术能在几小时内将极微量的DNA片段特异性地扩增上百万倍，从而解决了样品中DNA含量低，难以分离的难题。试举两例，说明PCR技术的应用。________________________________________________________________________。答案：(1)PCR过程的引物是一小段单链DNA或RNA，而细胞内DNA复制的引物是RNAPCR过程是高温变性解旋，不需要解旋酶(2)变性复性延伸(3)230(4)刑侦案件；亲子鉴定；疑难疾病的诊断；基因序列分析等(任选两例)4．1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能以RNA为模板合成DNA，并发现了催化此过程的酶。图为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请据图回答：(1)催化①过程的酶是________。(2)③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90℃～95℃...
