选修三专题1基因工程【考点解读】1、基因工程的诞生;2、基因工程的原理及技术;3、基因工程的应用;4、蛋白质工程
【基础知识回顾】1.1DNA重组技术的基本工具1、基因工程的原理:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外和,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
由于基因工程是在水平上进行设计和施工的,因此又叫做
2、限制性核酸内切酶(1)切割DNA的工具是,又称
(2)这类酶在生物体内能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保持细胞原有的遗传信息
(3)由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶(简称限制酶)
(4)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段,末端通常有两种形式,即和
3、DNA连接酶——“分子缝合针”根据DNA连接酶的来源不同,可以将它分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为coliEDNA连接酶
coliEDNA连接酶只能将连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接
另一类是从分离出来的,称为T4DNA连接酶
T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的,又可以“缝合”双链DNA片段的,但连接之间的效率比较低
4、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”(1)基因操作过程中使用载体两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制
(2)现在通常使用的载体是,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA,有的细菌中有一个,有的细菌中有多个
(3)质粒通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移,可以复制,也可整合细菌拟核DNA中,随着拟核DNA的复制而复制
(4)其他载体还有和等
(5)作为载体必须具备以下条件:能够在宿主细胞中复制并稳定地保存,