环境卫生学及消毒效果监测方法采样和检查原则1、采样后应尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过4h;若样品保存于0。。~4。。时，送检时间不得超过24h。2、不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查，当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查。常规监督检查可不进行致病性微生物检测，涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时，应进行目标微生物的检测。3、可使用经验证的现场快速检测仪器进行环境物体表面等微生物污染情况和医疗器材清洁度的监督筛查;也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证。一、空气微生物污染检查方法1、采样时间I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；II、III、IV类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。2、检测方法I类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照GB50333《医院洁净手术部建筑技术规范》要求进行检测。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。检测时将采样器置于室内中央0.8m~1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。房间大于10m2者，每增加10m2增设一个采样点。ll、lll、IV类环境采用平板暴露法：室内面积《30m2,设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿(690mm)放置各采样点，采样高度为距地面0.8m~1・5m;采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（II类环境暴露15min,lll、IV类环境暴露5min）后盖上平皿盖及时送检。将送检平皿置36。。±1。。恒温箱培养48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。3、结果计算1平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿•暴露时间）。空气采样器法计算公式:空气中菌落总数（cfu/m3）=1000L/minmin采样时间（）采样速率（）采样器各平皿菌落数之和（cfu）・・・・・・・・・（A.1）二、物体表面微生物污染检查方法1、采样时间潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。2、采样面积被采表面＜100cm2,取全部表面；被采表面M100cm2,取100cm2。3、采样方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1~4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。4、检测方法把采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至40C。〜45C。的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL〜20mL,36。。±比。恒温箱培养48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。5、结果计算平皿上菌落的平均数X采样液稀释倍数2物体表面菌落总数（cfu/m）=2米样面积（cm）三、医务人员手卫生检查方法1、采样时间采取手卫生后，在接触病人或从事医疗活动前采样。2、采样方法将浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含相应中和剂。3、检测方法把采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至40C。〜45C。的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL〜20mL,36C±1C。恒温箱培养48h,计数菌落数，必要时分离致病性微生物。4、结果计算平皿上菌落的平均数X采样液稀释倍数2医务人员手菌落总数（cfu/m）二30X2四、医疗器材检查方法1、采样时间在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。2、灭菌医疗器材的检查方法可用破坏性方法取样的，如一次性输液（血）器、注射器和注射针等参照《中华人民共和国药典》《无菌检查法》进行。对不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在100级洁净实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹，采样取全部表面或不少于100cm2；然...
