第2课时基因工程的一般过程与技术目标导航1.简述基因工程的一般过程。2.理解基因工程每个步骤的原理、方法和过程。3.了解以原核细胞、植物细胞和动物细胞为表达体的基因工程的一般过程。一、基因工程1．以原核细胞为表达体的基因工程(1)过程：以原核生物细胞(如大肠杆菌)为重组DNA“”表达体的基因工程的施工过程主要包括________________、________________、________________、筛选获得目的基因的受体细胞、________________并实现目的基因____________等五大步骤。(2)图示：2——．以植物细胞为表达体的基因工程抗软化番茄的培育过程二、转基因动物生产方法最常用的方法主要有两种，即________________的方法和____________________法。三、转基因技术1．常用的动物转基因技术有______________________和________________。2．常用的植物转基因技术：____________________技术、基因枪介导转化技术、____________技术。知识点一目的基因获取的方法1．下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③2．下列有关PCR技术的说法不正确的是()A．PCR技术是在细胞内完成的B．PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术C．PCR技术的原理与DNA复制的原理相同D．PCR技术的前提是有一段已知的目的基因的核苷酸序列知识点二制备重组DNA分子和转化受体细胞3．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是()A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C．将重组DNA分子导入烟草原生质体D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞4．下图为某种重组质粒简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有______________________、______________________、________________________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行____________________________。(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是______________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________________。(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是________，其合成的产物是________________。(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是________________________。知识点三筛选重组细胞和实现功能表达5．下图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRⅠ限制酶切割目的基因和该质粒，再用DNA连接酶连接形成重组质粒，然后导入大肠杆菌，最后将大肠杆菌放在四种培养基中培养：a—无抗生素的培养基，b—含四环素的培养基，c—含氨苄青霉素的培养基，d—含四环素和氨苄青霉素的培养基。含重组质粒的大肠杆菌能生长的是()A．aB．a和cC．a和bD．b和c6．目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因功能表达检测和鉴定的是()①检测受体细胞是否有目的基因②检测受体细胞是否有致病基因③检测目的基因是否转录mRNA④检测目的基因是否翻译蛋白质A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④知识点四基因工程的全过程7．回答有关基因工程的问题：(1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生______末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构...
