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细胞培养常识VIP免费

细胞培养常识_第1页
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1细胞培养目录1.实验所需器材 31.1 超净工作台 31.2 超净实验室 31.3 细胞培养箱 3冰箱 3细胞储存设备 3液体除菌过滤装置 3高温高压消毒装置 3离心机 4血细胞计数板 52.0 其他 52. 细胞培养试剂器材处理 52.1 培养液 52.2 血清 52.3 培养用品清洗 52.3.1 玻璃器皿的清洗 52.3.2 橡胶制品清洗 62.3.3 塑料制品的清洗 62.4 包装 62.5 灭菌 62.6 细胞房的日常维护 63. 细胞培养所需液体的配制 73.1 培养液 73.2 胰蛋白酶溶液 73.3 血清 73.4 PBS 与 MTT73.5 冻存液 73.6 洗液 73.7 新洁尔灭配制 83.8 消毒液配制 84. 细胞培养基本操作 84.1 无菌操作 84.2 原代培养 84.3 传代培养 84.3.1 传代前准备 824.3.2 胰蛋白酶消化 94.3.3 吹打分散细胞 94.3.4 分装稀释细胞 94.3.5 继续培养 94.4MTT 法筛选药物活性 94.4.1 种板 94.4.2 细胞计数方法 94.4.3 初始浓度化合物的配制 104.4.4 加药 104.4.5 力口 MTT104.4.6 力口 104.5 细胞冻存 10细胞复苏 1131.实验所需器材1.1 超净工作台这是一般实验室可采用的普及型无菌操作装置,其工作原理是利用鼓风机驱动空气经过高效过滤装置净化后在通过工作台面,在工作台面构成无菌环境,超净工作台应放在清洁无尘的房间,普通超净台可作生物安全 I 一级安全柜使用。1.2 超净实验室空气洁净度应达到 104颗粒/m3以下,并且应具有紫外杀菌装置,无菌操作间的房顶、墙壁、地面均应光滑、无死角、并定期进行清洁、消毒、检测。1.3 细胞培养箱一般情况下使用 CO2培养箱,这种培养箱不但恒温,还可以控制 CO2浓度(一般用 5%),可以稳定培养液的 pH,温度设置为°C,且温度变化一般不超过°C,体积通常在,相对湿度为,空气。CO2培养箱是实验室必备的仪器,但因其中需放置盛水容器而湿度较高,从而导致霉斑(经培养鉴定为丝状真菌)快速生长而影响工作,有碍观瞻和可能导致试验样本污染或院内感染扩散,所以要定期对培养箱进行消毒,气套式的培养箱用 75%酒精直接擦培养箱内壁即可。冰箱细胞培养所用的各种液体均应低温保存,C 冰箱用于存放培养、平衡盐溶液、消化液等即用液体,C 冰箱用来储存血清、胰蛋白酶、细胞培养所需添加的蛋白质性的生长因子等,因为这些液体需要冷冻以保持其生物活性使用时可以放入 C,避免反复冻融。细胞储存设备成功培养的细胞在不用或保存时可储藏在液氮储存罐中,由于液氮会不断挥发,...

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