吸入异氟烷对大鼠肺表面活性蛋白-ASP-A影响详解VIP免费

吸入异氟烷对大鼠肺表面活性蛋白-A（SP-A）的影响李志红1杨拔贤2安海燕2 （1 北京肿瘤医院麻醉科，北京，100036； 2 北京大学人民医院麻醉科，北京，100044）摘要目的观察大鼠吸入不同浓度异氟烷时，肺表面活性蛋白-A(SP-A)的含量及其基因表达的改变。方法雄性 Wistar大鼠 104只随机分为 5组：组 1，空白对照组（Con，n=8）；组2，40% O2对照组（ 40% O2，n=24）；组3，0.7%异氟烷组（ 0.7%Iso，n=24）；组4，1.5%异氟烷组（ 1.5%Iso，n=24）；组5，2.0%异氟烷组（2.0%Iso，n=24）。其中组 2吸入40% O2，组3、4、5大鼠分别吸入设定浓度的异氟烷（载气为40%O2）。除空白对照外，其余各组再分为三个亚组： 4小时组（4hr，n=8）、8小时组（8hr，n=8）和10小时组（ 10hr，n=8）。4hr和8hr亚组分别吸入各组气体 4小时和 8小时，组 2中10hr亚组吸入 40% O2 10小时， 3、4、5组中10hr亚组分别吸入设定浓度异氟烷 8小时，停药后再吸入 40% O2两小时。于设定时间点迅速处死实验大鼠， 取肺组织透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞结构变化；检测支气管肺泡灌洗液中SP-A的含量（ Western Blot）；Ⅱ型上皮细胞中 SP-A的含量（ IHC）；以及SP-AmRNA 的表达（ RT-PCR）。结果1．40%O2组中各亚组的各项指标与Con组均无显著差异。2．透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞结构：吸入异氟烷后，0.7%Iso组肺泡Ⅱ型上皮细胞形态学无明显改变；1.5%Iso组和2.0%Iso组的肺泡Ⅱ型上皮细胞可见明显形态学改变，尤以8hr亚组明显。3．支气管肺泡灌洗液（ BALF ）中SP-A的含量： 0.7%Iso组中4hr亚组外，各吸入异氟烷组大鼠的BALF 中SP-A的含量均较 Con组显著下降(p<0.01)；1.5%Iso组和2.0%Iso组中8hr亚组较 0.7%Iso组8hr亚组下降更明显（p<0.01）。各组内不同亚组间的比较可见： 0.7%Iso组中8hr、10hr亚组较 Con组明显下降（p<0.01），但两亚组间无明显差别； 1.5%Iso组与2.0%Iso组中各亚组均明显低于Con组（ p<0.01），各亚组间也未见明显区别。4．免疫组化检测肺Ⅱ型上皮细胞中SP-A的含量： 1.5%Iso组与2.0%Iso组肺泡Ⅱ型上皮细胞中 SP-A的含量明显下降，而 0.7%Iso组较Con组无明显变化。5．肺组织匀浆中的SP-AmRNA 含量：吸入异氟烷的各组中，0.7%Iso 组 SP-AmRNA 的含量与 Con组、 40%O2组均无明显差异；1.5%Iso与2.0%Iso组中4hr、8hr亚组SP-AmRNA 的表达均明显低于 Con组、40%O2组和0.7%Iso 组中相应的亚组，有统计学差异（p...