基因工程复习题一、名词解释: (10~20%)基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶的Star 活性 PCR 引物PCR 扩增平台期DNA 芯片基因组文库cDNA 文库转化限制与修饰系统原位杂交: 将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上,然后用探针与之杂交的一种核酸分子杂交技术,该方法可较好地反映目的基因在细胞或组织中的分布和表达变化。粘性末端:双链DNA 被限制性内切酶切割后,形成的两条链错开几个碱基,而不是平齐的末端。Northern 印迹杂交:将RNA 进行变性电泳后,再转移到固相支持物上与探针杂交的一种核酸分子杂交技术,可用于检测目的基因的转录水平。转位:一个或一组基因片段从基因组的一个位置转移到另一个位置的现象。基因工程:在体外,用酶学方法将各种来源的DNA 与载体 DNA 连接成为重组DNA ,继而通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞,最后进行扩增得到大量相同重组DNA 分子的过程称为基因工程,又称基因克隆、DNA 克隆和重组DNA 等。目的基因:基因工程中,那些被感兴趣的、被选作研究对象的基因就叫作目的基因。连接器: 人工合成的一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段,连接到目的基因的两端,便于基因重组中的切割和连接。转化:受体细胞被导入外源DNA 并使其生物性状发生改变的过程。停滞效应: PCR 中后期,随着目的DNA 扩展产物逐渐积累,酶的催化反应趋于饱和,DNA扩增产物的增加减慢,进入相对稳定状态,即为停滞效应,又称平台期。逆转录 PCR:以 mRNA 为原始模板进行的PCR 反应。PCR: 即聚合酶链式反应。在模板,引物,4 种 dNTP 和耐热 DNA 聚合酶存在的条件下,特异性地扩增位于两段已知序列之间的DNA 区段地酶促合成反应。α-互补( α-complementation ):指在 M13 噬菌体 DNA 或 PUC 质粒序列中,插入了lac 启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端 145 个氨基酸的核苷酸序列(又称α-肽),该序列不能产生有活性的β-半乳糖苷酶。感染( infection )特指以λ 噬菌体、粘粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。其中,由噬菌体和细胞病毒介导的遗传信息的转移过程又称为转导(transduction)。47、转染( transformation )指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA 片段而获得新的表型的过程。二、填空题( 20%)1、DNA 片段重组连接的方法主要有...