美国药典微生物检测精要VIP专享VIP免费

美国药典微生物检测精要培训小结一 微生物实验室规范重要的控制点：无菌技术、培养基控制、菌种控制、设备操作与控制、数据记录与实验室布局和运作、员工培训等。1 无菌技术：防止和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作方法和管理方法。可通过无菌环境、灭菌、消毒、卫生要求、无菌操作技术等手段来实现。2 培养基：是微生物实验工作的核心。包括培养基制备、培养基储存、培养基质量控制。2.1 培养基制备2.1.1 根据既定的目的选用正确的培养基2.1.2 参考生产商的ＣＯＡ和说明书：关于配制、储存和菌种选用等。2.1.3 所用的水应为去离子水或蒸馏水，应记录用量。2.1.4 成分的称量应用校准过的天平，根据称量量的不同选择合适的天平。使用清洁的容器和工具（<1051>玻璃器皿清洁）以防外来污染和抑制剂。应记录称量量。2.1.5 加热帮助溶解时应防止过度加热，通常培养基颜色变深说明加热过度了。2.1.6 灭菌条件：灭菌参数应验证，验证应同时考虑无菌和培养基生长能力采用高压蒸汽灭菌或过滤灭菌。湿热灭菌应考虑装载分布，加热速度过慢会使培养基过度加热，通常为 121 15min℃，此时间是指培养基温度达到 121℃后15min。保证最低 SAL，在无菌和过度加热之间平衡。与污染物分开灭菌消毒结束后，不应在灭菌柜中储存培养基，过度加热会影响培养基颜色、澄清 、pH 和凝固能力。2.2 培养基储存2.2.1 制备培养基的储存琼脂培养基易受冷冻影响，低于 0℃会破坏凝胶结构。应避光避热，密封防止水分蒸发（建议使用螺旋盖的瓶子密封，保存时间长）。2.2.2 培养基融化不能超过一次，以防过度加热或潜在污染。融化可采用水浴、流通蒸汽或微波炉加热。微波炉加热宜采用少量多次，以防过度。培养基融化后在 40-50℃水浴中储存不应超过 8 小时，浇制平皿前应擦干以防污染。2.2.3 培养基标示培养基名称批号、制备批号制备日期、有效期2.2.4 有效期确定根据成分、配方、容器、储存条件等确定有生长能力试验数据支持2.2.5 应在验证过的条件下储存2.2.6 重要区域环控用培养基必须双层包装最终灭菌，否则进行全数培养及用前检查2.2.7 根据当地生物危险品安全程序处置过期培养基2.3 培养基质控2.3.1 灭菌后培养基检查2.3.1.1 生长能力每批制备的培养基均需进行测试菌种根据药典，供应商说明书及环境中分离得到测试不合格应进行调查，如无原因，或无有效纠正措施，不得使用该批号2.3.1.2 无菌2.3....