吸 收 激光 发谱发 e.g.,射 荧光 光谱E=E1-E2=hv第二章 临床生物化学实验室基本技术与管理实验室的基本技术与管理是临床生物化学检验工作的重要基础。本章所涉及的实验室基本技术与管理主要是应用于临床生物化学检测的分析技术与质量管理,目的在于加强基础,提高生物化学检验的质量。对于实验室的其他基本知识,基本技术以及实验室的管理方法,可参阅其他相关教材。第一节 常用临床生物化学分析技术 临床生物化学分析技术很多,常用的主要有光谱分析技术、电泳技术、离心技术、层析技术 、电化学分析技术等。一、光谱分析技术利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征,来确定其性质、结构或含量的技术,称为光谱分析技术。根据光谱谱系的特征不同,可把光谱分析技术分为发射光谱分析、吸收光谱分析和散射光谱分析三大类。在临床生物化学检验中,光谱分析是一类十分重要的技术 ,应用极为广泛。分光光度法(spectrophotometry) I.光谱分析法(photometry)1. 定义:根据物质吸收、发射或散射辐射能而建立起来的一类分析方法。2.光的基本性质:高速传播的电磁辐射;具有波动性(=c/v)和微粒性(E=hv);短波能量大,长波能量小3.物质对光吸收的基本原理:能量转移----当光辐射通过某种物质时,组成该物质的分子与光子发生“碰撞”,光子的能量就转移至分子、原子上,使它们由基态(低能态)跃迁到激发态(高能态),这种跃迁称为激发。选择吸收----组成物质的分子仅吸收与其内能变化(基态与激发态能量差)相对应的波长或频率的光,所得到的光谱称为吸收光谱。能量释放----处于较高能态的分子(激发态分子)不稳定,当其返回基态时,以热或发射光谱的形式将能量释放出来。所发射出的相应光谱,称分子发射光谱。4. 分类(1) 吸收光谱分析法:根据溶液能吸收由光源发出的某些波 长 的 光 后 所形成的特征光谱来鉴定该 物 质 的 性 质和含量的方法。激发态(E1)基态(E0)可见、紫外分光光度法(visible and ultraviolet spectrophotometry) *原子吸收光谱法(atomic absorption spectrophotometry):微量金属元素红外分光光度法(2) 发射光谱分析法:根据物质受到热能或电能等的激发后所发射出的特征光谱来进行定性及定量分析的一种方法。(3) 比浊/散射光谱分析法:测定光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度的一类定量方法。 比浊法(turbidimetry):在光源的光路方向上测定透射光强度(透射光&散射光)与入射光...