根据测OD 时光的波长,波长在紫外范围就能够测,如果不在,就不能测量。 非常感谢细履平沙.哪位能说的具体一点啊,我想测枯草芽孢杆菌的OD,我不太知道是在多少 nm 下测,我看过一些文献,上面说细菌大概 600nm,还是我自己摸索吸收波长啊?另外是测吸光度还是透光率啊,空白用培养基做吗. 请高人指点,谢谢了. 一般测菌体密度的OD 的波长范围是 580nm-660nm 我们哪会儿测的(枯草芽孢杆菌)用 600nm,已经属于可见光区 空白如用水做,需要离心洗涤菌体, 空白如用不接种的培养基做就不需要洗涤,但是不接种的培养基要和接种的同时培养,以求条件一致 最后注意如果OD 大于 2.0,一般要稀释后再测,因为 OD 太大了,分光光度计的灵敏度就会显著降低 一般都测吸光值,而且最好是整个实验过程中,保持发酵液或菌体的稀释倍数一致,吸光值与稀释倍数不一定成正比,可保证整个实验点有可比性 一般 OD 值在控制在0 .1-0.4 最好,在这个区内的值就可靠,最好不要超过 1.0 取值的时候要连续读数,重复 3 次的数最好。 测菌体密度的 OD 的波长可以自己摸出来,看看用哪个波长有最大吸收就可以了。 有合适的现场用的分光光度计推荐吗?要求只用作菌浓的 OD 值测定,哪种最便宜的分光光度计可以选择? DNA 合成常见问题及解答 Q: 怎样对合成 DNA 制品进行定量? A: DNA 的量与 260 nm 处的吸光度值(OD 值)成正比,因此使用紫外分光光度计定量是最科学的。1 个 OD 值的合成 DNA 的重量约为 33 mg。 Q: 怎样理解测定的 OD 值? A: 进行 OD 值测定时,分光光度计上显示的数值为每毫升溶液中的 OD值。当测定 200 ml 溶液中的 OD 值为 1.5 时,溶液整体的 OD 量应该为多少?此时的 OD 值 = 1.5 OD/ml × 0.2 ml = 0.3 OD。 Q: 合成 Oligo DNA 应怎样保存? A: 保存合成的 Oligo 应该注意以下几点: 1. 干燥制品很稳定,常温下数个月无问题。但为保证万无一失,放置于-20℃保存为好。 2. 溶解后的溶液 DNA 短期内(1-2 周)使用可放置在 4℃下保存,长期保存请放置于-20℃。溶解 DNA 时,请注意使用无菌、无核酸酶的水或TE Bu ffer。 3. 荧光标记引物请避光保存。 Q: 合成 DNA 溶液在室温下放置了数天,还可以使用吗? A: 溶液中的 Oligo DNA 常温下数天(3-4 天)应该没问题,但最好不要放置一个星期以上。其寿命受溶液中的菌体、核酸酶等的影响。 Q: 制品溶解...