概念：是编码产生蛋白质或RNA 等具有特定功能产物的一段具有遗传效应的DNA 片段，是控制生物性状的基本遗传单位。 孟德尔——遗传因子 Yohannsen——基因 发展历程 摩尔根——基因位于染色体上 基因: 遗传物质的基础是核酸（DNA） 三联子密码 基因的结构与功能 转录与翻译 控制生物形状 概念：是指对基因进行分离、分析、改造、重组、转移、检测和表达等操作的简称 获得目的基因 目的 基因与克隆载体连接，形成重组子 将 基本步骤 重组子转化受体细胞，获得转化子 转化子检测和筛选 目的基因在受体中被表达，获得所需的遗传性状或产物 基因操作的剪刀：限制性内切酶 基因操作的针线：连接酶 工具 基因操作的载体：质粒与病毒 基因操作的车间：细菌(大肠杆菌）、真菌（酵母）和病毒 基因具有相同的物质基础 基因是可切割和可粘合的 基因是可转移的 多肽与基因之间有对应关系 遗传密码通用 基因可以复制遗传 概念：专指为实践应用而进行的基因重组事件，具体是指通过基因操作来定向改变或修饰生物体，并具有明确应用目的的活动。 基因工程 诞生与发展：1973 年（基因工程元年） 生物感应器 应用 遗传改良 基因治疗 基因工程概述 基因 操作 理论依据 第一章 概念：是一类能识别双链DNA 分子内部某种特殊的核苷酸序列，并使每个核酸链上特定部位相邻的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开的一类核酸内切酶。 限制性内切酶 第一个字母：取宿主属名首字母，大写斜体。 第二、三个字母：取宿主种名前两个字母，小写斜体 第四个字母：为宿主的株号，正体 第五个字母：发现顺序号，大写罗马字体，正体 现象 限制与修饰 1 型 种类 2 型 3 型 识别长度：4-8 个碱基，最常见6 个碱基 限制酶识别序列 识别序列结构:回文结构 切割位置：在识别位置的内部或两侧 平末端 黏末端 概念：指来源不同，但识别相同靶序列，切割产生不同或相同末端的限制性内切酶。即不同来源的限制性内切酶可切割相同的序列。 限制酶产生的末端 同序同切酶（完全同裂酶） 类型： 同序异切酶（非完全同裂酶） 同尾酶：指来源各异，识别靶序列各不相同，但切割产生相同末端的限制性内切酶。同尾酶切割DNA 得到的产物可进行互补连接。 DNA 末端长度对限制酶切的影响 位点偏爱 星星活性 缓冲液 酶切反应条件 反应温度 反应时间 终止酶切方法：EDTA 螯合镁离子，加热，苯酚抽提去除蛋白质或试剂盒纯化DNA...
