TaKaRa Code：D101A pMD® 18-T Vector 说明书 宝生物工程(大连)有限公司 目 录 内 容 Page ●制品说明 1 ●制品内容 1 ●保 存 1 ●纯 度 1 ●用 途 1 ●pMD® 18-T Vector的结构 1 ●实验操作 2 ■Control DNA 片段的克隆实验 2 ■一般 DNA 片段的克隆实验 2 ●相关说明 3 ●使用注意 4 ●Q&A 4 ●制品说明 pMD®18-T Vector是 一 种 高 效 克 隆 PCR产 物（ TA Cloning）的 专 用 载 体 。本 载 体 由 pUC18 载 体 改 建 而 成 ，在 pUC18 载 体 的 多 克 隆 位 点 处 的 Xba I和 Sal I识 别 位 点 之 间 插 入 了 EcoR V识 别 位 点 ， 用 EcoR V进 行 酶 切反 应 后 ， 再 在 两 侧 的 3＇ 端 添 加 “ T” 而 成 。 因 大 部 分 耐 热 性 DNA聚 合 酶 进 行 PCR反 应 时 都 有 在 PCR 产 物的 3＇ 末 端 添 加 一 个 “ A” 的 特 性 ， 所 以 使 用 本 制 品 可 以 大 大 提 高 PCR产 物 的 连 接 、 克 隆 效 率 。 由 于 本 载 体 以 pUC18 载 体 为 基 础 构 建 而 成 ， 所 以 它 具 有 同 pUC18 载 体 相 同 的 功 能 。 此 外 ， 本 制 品 中 的 高效 连 接 液 Solution I 可 以 在 短 时 间 内 （ 约 30 分 钟 ） 完 成 连 接 反 应 ， 其 连 接 液 可 以 直 接 用 于 细 菌 转 化 ， 大大 方 便 了 实 验 操 作 。 本 制 品 中 的 Control Insert（ 500 bp） 还 可 以 用 于 Control 反 应 。 ●制品内容 pMD®18-T Vector（ 50 ng/μl） 20 μl× 1 支 Control Insert（ 50 ng/μl） 10 μl× 1 支 Solution I* 75 μl× 2 支 * 使用时请于冰中融解。 ●保 存： -20℃ ●纯 度 ■ Control Insert 经 克 隆 后 的 白 色 菌 落 中 ， 有 90%以 上 含 有 Insert DNA 片 段 。 ●用 途 ■ 进 行 TA 克 隆 ， 克 隆 PCR 产 物 。 ■ 对 克 隆 后 的 PCR产 物 使 用 BcaBESTTM Sequencing Primers、 M13 Primers进 行 DNA测 序 。 ●pMD® 18-T Vector的结构 pMD® 18-T Vertor (2,692 bp) -1- 【pMD® 18-T Vector相...
