Real-time qPCR 手册---手把手教你从菜鸟到高手 由于Real-time qPCR 的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项常规技术。越来越多的研究文章中涉及RT-PCR 的实验，也基本上被real-time qPCR 所代替。由于real-time aPCR 输出的数据不同于常规的由于Real-time qPCR 的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项常规技术。越来越多的研究文章中涉及RT-PCR 的实验，也基本上被real-time qPCR 所代替。由于real-time aPCR 输出的数据不同于常规的PCR 电泳检测，很多没有做过real-time qPCR 的研究者常常感到高深莫测，不知从何入手；甚至一些做过次实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑，不知所措。 本文就从real-time qPCR 的发展史说起，包括real-time qPCR 的原理，实验设计，实际操作，数据分析，常见问题解答五个方面，手把手教你从各个方面了解real-time qPCR ，彻底的从菜鸟到高手！ 一、Real-time qPCR 发展史 Real-time qPCR 就是在PCR 扩增过程中，通过荧光信号，对PCR 进程进行实时检测。由于在PCR 扩增的指数时期，模板的Ct 值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。由于常规的PCR 的缺点，real-time qPCR 由于其操作简便，灵敏度高，重复性好等优点发展非常迅速。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP 检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。 在Real-time qPCR 技术的发展过程中，定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年，美国 PE 公司（已经并入Inv itrogen 公司）成功研制了Taqman 技术，1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有ABI7000、7300、7500，7700、7900HT、StepOnePlu sTM、StepOneTM、PRISM@StepOneTM 系列；BIO-RAD 的CFX96、iCy cler iQ5@、My iQ@、MJ Research Chromo4TM Opticon 系列；StratageneMx TM 系列；Roche LightCy cler@系列；EppendorfMasercy cler@；Corbett Rotor-GeneTM；Cepheid SmartCy cler@和 BIOER 的LineGene 系列。 随国内生命科学的快速发展，科研水平不断提高，发高水平文章已不再是新鲜事。与其同时，国内公司经过长期不懈的努力，也有自主研发的real-time PCR 仪器生产比如西安天隆科技公司的TL 系列仪器。 二、...
