2025年免疫学实验凝集试验VIP免费

实验一 凝集实验颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与对应抗体结合后，在有适量电解质存在下，抗原颗粒可互相凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反映(Agglutination reaction)或凝集 实 验 。 参 加 凝 集 反 映 的 抗 原 称 为 凝 集 原 （ Agglutinogen ） ， 抗 体 称 为 凝 集 素（Agglutinin）。细菌或其它凝集原都带有相似的负电荷，在悬液中互相排斥而呈现均匀的分散状态。抗原与对应抗体相遇后能够发生特异性结合，形成抗原抗体复合物，减少了抗原分子间的静电排斥力，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参加下，由于离子的作用，中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之失去了彼此间的静电排斥力，分子间互相吸引，凝集成大的絮片或颗粒，出现了肉眼可见的凝集反映。根据与否出现凝集反映及其程度，看待测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。凝集反映涉及直接凝集反映和间接凝集反映两大类，本实验重要介绍直接凝集反映。[目的规定]1. 掌握平板凝集实验和试管凝集实验的操作办法。2. 掌握凝集实验的成果鉴定及鉴定原则。3. 熟悉平板凝集实验和试管凝集实验所需材料和试剂。[材料与试剂]1. 玻板，载玻片，试管（1cm x 8cm），试管架，刻度吸管，滴管，微量可调加样器，滴头（tip 头），牙签或火柴棒，记号笔。2. 灭菌的生理盐水，灭菌的 0.5%石炭酸生理盐水。3. 布氏杆菌病试管凝集抗原，布氏杆菌病平板凝集抗原，布氏杆菌病虎红平板凝集抗原，布氏杆菌病阳性血清，布氏杆菌病阴性血清，被检血清（牛、羊或猪）。4. 鸡白痢平板凝集抗原，鸡白痢阳性血清，鸡白痢阴性血清，被检鸡血清。[实验内容及操作办法]（一）试管凝集实验以牛布氏杆菌病试管凝集实验为例。1. 试管准备：每份血清用试管 4 支，另取 3 支试管作为对照，作好标记，置试管架上。如被检血清有多份，对照只需做 1 份。2. 被检血清稀释：第 1 管加入 2.3 ml 0.5% 石炭酸生理盐水，第 2、3、4 管加入0.5 ml 0.5% 石炭酸生理盐水；然后用加样器或刻度吸管吸取被检血清 0.2 ml ，加入第 1 管中，重复吹吸 5 次混匀，吸取 1.5 ml 弃之，再吸取 0.5 ml 加入第 2 管中，混匀后吸取 0.5 ml 加入第 3 管，依这类推至第 4 管，混匀后吸弃 0.5 ml （见表 1-1）。该被检血清的稀释度分别是 1:12.5、1:25、1:50、1:100。3. 对照管制作：第 5 管中加 0.5% 石炭酸生理盐水 0.5...