粗多糖的检验方法MicrosoftWord文档VIP专享VIP免费

粗多糖的检验方法 1、方法原理 粗多糖在硫酸的作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚 缩合成有色化合物，用分光光度法测定样品在粗多糖含量。 2、主要设备和仪器 设备721 型分光光度计（上海第三分析仪器厂） 试剂 葡萄糖标准液：精确称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖0.1000g，置 100mL 容量瓶中加热蒸馏水溶解稀释至刻度，其浓度为1.0mg/mL，用稀释成浓度为 0.1mg/mLd 的标准工作液。 5%苯酚溶液：取苯酚100g，沙浴蒸馏，收集 180℃-182℃溜分，称取此馏分5g，用水溶解后，定容至 100mL 棕色容量瓶中备用（现用现配）。 3、测定步骤 3.1、最大吸收波长的选择 精密吸取0.04mg/mL 无水葡萄糖溶 1.0 mL，置 10mL 具塞试管中，加入蒸馏水使体积为 2.0mL，再加苯酚试液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0mL，摇匀后放置 5min，置沸水浴中加热 15min，取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如加上法配制空白。用721分光光度计在470-510nm 测定吸光度，测定最大吸收波长为490± nm。 3.2、标准曲线的绘制 精密吸收浓度为 0.1mg/mL 的葡萄糖标准标准工作液 0、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80mL，分别置于 10mL 具塞试管中，各加蒸馏水使体积为 2.0mL，再加苯酚试液 1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸 5.0 mL，摇匀后放置 5min，置沸水浴中加热 15min，取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如上法配制空白。用 721 分光光度计，1cm 比色皿，在 490nm 处测定吸光度，绘制葡萄糖浓度-吸光度工作曲线。结果浓度在 0.010-0.04mg/mL 范围内与吸光度呈现性关系。 回归方程 Y=7.52×10-3X+1.13×10-3, Y=0.9997(n=6)。 3.3、含量测定 3.31、多糖的提取与精制 取 300mL，用氟仿多次萃取，以除去蛋白质，加活性炭 1%脱色，抽滤，滤液加入 95%乙醇，使含醇量达 80%，静置过夜。过滤，残渣用无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，真空干燥，即得粗多糖。 3.32、供试液的配制 精密称取粗多糖粉末 0.2000g，置于 50mL 容量瓶中，定容，摇匀，即得供试品溶液。 3.33、样品含量测定 精密度吸取供试品溶液 2.0mL，按“标准曲线绘制”项下方法分别测定吸光度。 结果计算： 多糖含量（%）=（C·D）/V× 100 式中： C－供试液葡萄糖浓度（mg/mL）； D－代试液的稀释因素； V－供试液体积（mL）。 粗多糖的检验方法 1. 范围 本方法规定了保健食品中以葡聚糖为主要结构分子量在 10000 以上的水...