1 检验技术资格考试考点精要——微生物学检验（中级） 1. 生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。超净工作台应采用层流技术净化空气、选择垂直气流通风方式。 2. 结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3. 药物敏感试验：纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用：单片纸碟法、试管稀释法（以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点，该管含药浓度为最低抑菌浓度 MIC或最低杀菌浓度 MBC），两值越低则表示越敏感。MIC与抑菌圈呈负相关，即抑菌环直径越大，MIC越小。 4.常用的免疫技术：酶免疫技术（EIA）、协同凝集试验、免疫荧光技术（IF）、对流免疫电泳（CIE）、免疫印迹技术。 病原菌核酸的检测：核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术。 PCR技术—是选择 DNA或 RNA体外扩增技术，用标本提取 DNA为扩增模板，选用一对特异寡核苷酸为引物，PCR一般要经历三十多次循环，经不同温度变性 93-94℃（作用 1min氢键断裂形成单链 DNA）、退火 40-60℃（迅速冷却 30-60s引物与 DNA模板结合，形成局部双链）、延伸 70-75℃（在TaqDNA聚合酶作用下，以 A、T、G、C四种脱氧核苷酸为原料，从引物 5‘端→3‘端延伸，合成与模板互补的 DNA链。），扩增产物用溴乙啶染色的凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。 基因芯片技术（DNA芯片、DNA微阵列）—主要过程：DNA微阵列的制备、样品的制备、靶分子和探针之间的杂交、杂交信号的检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。 核酸杂交（基因探针杂交技术）--是指单链 RNA和 DNA或 DNA和 DNA或 RNA和 RNA，根据碱基配对原则，借氢键相连而形成杂交分子的过程。杂交百分率＞70%（≥69%）为高度同源性，同源性在 60%以上是一个种，同源性在 60%--70%是同一种内不同亚种，同源性在 20%--60%同一属内不同菌种，同源性 20%≤不同属的菌种。 AFLP的含义是----扩增片段长度多态性。有很大功能的 DNA指纹技术。一种是罕见切割酶，一种是常用切割酶。具有 RFLP技术的可靠性和 PCR技术的高效性。 5.细菌诊断流程有：双岐索引法，表解法，数字编码鉴定法。致病性岛：由基因编码决定的一 2 团与致病性相关的基因组。 6. 病原细菌确定原则：（郭霍Koch原则）1、从一种疾病病人中能有规律地发现一种细菌2、能够分离这种细菌获得纯培养 3、把这种细菌的培养物引入易感动物体内，...
