1大规模培养细胞技术摘要:细胞培养工作始于 20 世纪初,现已广泛应用于生物学、医学各个领域,成为细胞与组织研究的重要技术之一。近年来,随着基因工程和细胞工程技术的不断发展,动物细胞培养已成为人规模生产一系列有商品价值的生物制品的重要宿主,当前人们已经能够生产多种单克隆抗体、激素、细胞因子、病毒疫苗和具有特殊功能的效应细胞等。但是,实验室采用的细胞培养技术获得的细胞量有限,不能满足生产的需求,必修改用超产培养技术方法方可获得人量细胞,目前这种技术种类繁多,归纳起来有三大类:①贴壁培养法;②悬浮培养法:③固定化培养法。细胞体外培养技术的不断发展和完善,为组织和器官培养以及现代生物技术前沿的转基因动物技术、克隆技术、干细胞定向分化、体外受精、性别控制等一系列技术的发展奠定了基础。关键词:细胞培养;贴壁:悬浮:固定化前言动物细胞培养开始于本世纪初 1962 年,动物细胞培养规模开始扩大,发展至今己成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法,利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等,动物细胞培养己成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品己占世界生物高技术产品市场份额的 50%。动物细胞大规模培养技术是生物技术制药中非常重要的环节。本文对细胞的培养工艺做一综述。1 •细胞培养的定义细胞培养是指从体内组织取出细胞模拟体内环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤成纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可重复取材等优点,它在临床染色体分析中使用最广泛。体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化,成为永久细胞系,也可直接建成永久细胞系,永久细胞系能在体外无限制制的传代和生长。永久细胞系通常具有非整倍体细胞和各个细胞的核型不完全相同特征。但细胞克隆的细胞系其这一特征可以不明显。人规模细胞培养技术22 •动物细胞培养的工艺2.1 贴壁培养法贴壁培养是指细胞贴附在一定的固相表面进行单层培养。贴壁依赖性细胞在培养时要贴附于培养容器的壁上,细胞一经贴壁就迅速铺展,然后开始有丝分裂,并很快进入对数生长期。一般数天后就铺满培养表面,并形成致密的细胞单层。3参考...