几种分子遗传标记技术简介动物遗传标记课程作业动物遗传标记课程作业分子遗传标记概述1主要分子标记技术4分子遗传标记优越性2分子遗传标记分类3几种分子标记的比较5分子遗传标记概述20世纪70年代以来，随着分子生物学的发展，相继建立了RFLP、RAPD、AFLP、SNP、SSCP等分子遗传标记检测技术。分子遗传标记（MolecularGeneticMarkers）是以个体遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接的反映。动物遗传标记课程作业多为共显性在生物发育的不同阶段，不同组织的DNA都可用于标记分析表现为中性，不影响目标性状的表达基因组变异极其丰富，分子标记的数量几乎是无限的检测手段简单快捷，易于实现自动化动物遗传标记课程作业分子遗传标记的优越性分子遗传标记的分类动物遗传标记课程作业Southern杂交为核心的分子标记，如RFLPDNA芯片技术为基础分子标记，如SNPPCR技术为基础的分子标记，如RAPDPCR与酶切技术结合的分子标记，如AFLP分子标记主要的分子遗传标记原理：用限制性内切酶切割基因组DNA后，基因组DNA在检测区域内发生了重排、插入、缺失或点突变，导致酶切位点发生改变，从而形成了大小不等、数量不同的酶切片段，当这些片段通过凝胶电泳时就形成不同的带，用分子探针杂交并利用放射自显影成像时，不同程度的RFLP谱带表示其多态性。动物遗传标记课程作业1、RFLP（RestrictionFragmentLengthPolymorphism）限制性片段长度多态性动物遗传标记课程作业RFLP的优点①样品纯度要求较高，样品用量大；②多态信息含量低；③步骤繁琐、工作量大、成本较高。动物遗传标记课程作业①较高的可靠性；②标记数目是无限的；③标记为共显性；④标记之间无干扰；⑤不受年龄性别以及外界环境的影响。RFLP的缺点RFLP的应用分子水平上选择目的性状进行品种或品系遗传纯度的测定改良回交育种技术生物进化和分类疾病诊断方面的应用特别适应于构建遗传连锁图动物遗传标记课程作业2、AFLP(AmplifiedRestrictionFragmentPolymorphism)扩增片段长度多态性:原理：基因组DNA经两种限制性内切酶酶切，形成分子量大小不等的随机酶切片段，将特定的人工合成的短的双链接头连在这些片段的两端，形成一个带接头的特异片段，用含有选择性碱基的引物对摸板DNA进行扩增。扩增产物经放射性同位素标记、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，然后根据凝胶上扩增产物的多态性来检出多态性。动物遗传标记课程作业动物遗传标记课程作业AFLP的优点动物遗传标记课程作业①多态性丰富且清晰可辨，一次AFLP分析可检测到100~150个标记；被认为是指纹图谱技术中多态性最丰富的一项技术；②可靠性好，重复性高；③DNA需要量少；④引物在不同物种间是通用的；⑤AFLP分析的扩增片段较短（30-700bp)，分辨率高。AFLP的缺点①对DNA模板质量要求高，对其浓度变化不敏感；②显性标记，只能表明目的条带的有无，不能区分纯合子和杂合子；③操作复杂，耗时，成本高。AFLP的应用动物遗传标记课程作业遗传图谱的构建；基因标记及定位；种及种下阶元的分类鉴定；遗传距离及杂种优势的利用；遗传多样性和系统进化的研究。3、SSCP（SingleStrandConformationPolymorphism)单链构象多态性单链构象多态性检测是一种基于单链DNA构象差别来检测点突变的方法。原理：单链DNA分子内的相互作用力使其呈现复杂的空间折叠构象，当有一个碱基发生改变时，其空间构象发生变化，这些空间构象存在差异的单链DNA分子在凝胶中受排阻大小不同。因此，通过电泳可以将构象上有差异的分子分离开，形成了单链构象多态性。动物遗传标记课程作业动物遗传标记课程作业动物遗传标记课程作业SSCP的优点①操作简便，实验步骤少，周期短；②具有高的灵敏性，仅单个碱基差异亦可检测出来，拓展了检测范围；③能得到更多的图谱信息，更详细的分型结果。SSCP的缺点①只能作为突变检测方法，要确定突变的位置和类型，还需进一步测序；②受外界影响较大，电泳条件要求较严格；③易造成漏检。SSCP的应用动物遗传标记课程作业基因点突变的监测大量样本的筛选cDNA的筛查检测人类遗传性疾病病毒...
