1酵母菌杂交育种2酵母菌简介酵母菌（yeast）是低等真核微生物，分属于子囊菌纲、半知菌纲和担子菌纲。大多数酵母菌为单细胞，一般呈卵圆形、圆形或圆柱形。细胞结构类似于高等生物，细胞壁的主要成分为葡聚糖和甘露糖，此外还有蛋白质和脂类等。酵母细胞除细胞壁之外还有细胞核、核膜、核仁等结构。大多数酵母的菌落和细菌相似，只是比细菌的3菌落大而厚，菌落表面湿润、粘稠并多呈乳白色，少数为红色。酵母菌是真核生物中最简单的单细胞微生物，具有真核生物所有的共性，染色体结构、功能和高等生物细胞相类似。存在单倍体和二倍体的生活史，二倍体生活力强，生产能力高，可通过杂交得二倍体来育种。4酵母菌的杂交育种一、概述杂交育种是指将两个基因型不同的菌株的有性孢子或无性孢子及其细胞，互相联结、细胞核融合，随后细胞核进行减数分裂或有丝分裂，遗传性状出现分离和重新组合的现象，产生具有各种新性状的重组体，然后经分离和筛选，获得符合要求的生产菌株。由此可见，微生物的杂交现象包括有性杂交及菌体细胞重组两个方面。5尽管一些优良菌种的选育主要是采用诱变育种的方法，但是某一菌株长期使用诱变剂处理后，其生活能力一般要逐渐下降，如生长周期延长、孢子量减少、代谢减慢、产量增加缓慢等。而杂交育种是选用已知性状的供体和受体菌种作为亲本，因此不论在方向性还是自觉性方面，都比诱变育种前进了一大步，所以它是微生物菌种选育的另一重要途径。但由于杂交育种的方法复杂，工作进度慢，因此还很难象诱变育种那样得到普遍的推广和应用。6酵母菌的育种在食品工业中占有极其重要的地位。它的杂交育种工作也开展得较早，也取得有益的成果。例如在面包酵母种间进行杂交，获得了许多生产性能良好的菌株，它们的繁殖能力和发酵能力比亲本菌株强；采用面包酵母和酒精酵母杂交，其杂交种的酒精发酵能力没有下降而发酵麦芽糖的能力却比亲本菌株高。7在啤酒酿造中，用上面酵母和下面酵母杂交，得出的杂种可生产出浓度和香味更好的啤酒等。以上这些酵母均具有不同的交配型，因而都是通过有性杂交获得。对于无典型有性生殖的酵母菌如假丝酵母，可通过准性生殖过程进行杂交。但是酵母菌的杂交育种中大多数为有性杂交。8二、酵母菌有性杂交技术1.有性杂交一般指性细胞间的接合和随之发生的染色体重组，并产生新遗传型后代的过程。借助有性重组，使不同菌株的遗传物质得以交换（获优良性状集中的重组体）。凡是能产生有性孢子的酵母菌或霉菌，原则上都能采用与高等动、植物杂交育种相似的有性杂交方法进行育种。9准性生殖是一种类似于有性生殖但比它更原始的一种生殖方式。它可使同一种生物的两个不同来源的体细胞经融合后，不经过减数分裂和接合的交替，不产生有性孢子和特殊的囊器，仅导致低频率的基因重组，重组体细胞和一般的营养体细胞没有什么不同。准性生殖多见于一般不具典型有性生殖的酵母和霉菌。102.杂交方式：孢子与孢子；孢子与单倍体细胞；单倍体细胞间。3.酵母菌通过有性杂交进行杂交育种主要包括子囊孢子的形成子囊孢子的分离酵母杂交种的获得三个步骤。11酵母菌有性杂交程序亲本的单倍化↓有性杂交↓杂交后代的检出↓筛选优良性状个体12高耐性酿酒酵母的杂交育种1.单倍体的制备将酿酒酵母AY-15,M1分别于YEPD液体培养基中于28℃培养48h,离心洗涤,弃上清液,将酵母泥接种于微量元素培养基平板上,于25℃培养5d,在显微镜下可以观察到有子囊孢子的形成,收集平板培养基上的菌体。制备菌悬液(106),用2%的蜗牛酶于30℃水浴处理60min,然后于50℃水浴振荡处理10min,杀死二倍体营养细胞,将粘连的孢子打散后13涂布YEPD培养基平板,挑取小菌落点接在生孢培养基上,于25℃培养6d后镜检,不生孢子者为单倍体,将单倍体分别挑至斜面,统一编号,于4℃下保存。2.单倍体接合能力及接合型的鉴定将获得的单倍体菌株分别与标准a型、α型菌株混合培养,与a型菌株形成哑铃形接合子的待测菌株为α型,与标准α型菌株接合的待测菌株为a型,与a型、α型菌株均不接合的为不育型菌株。143.单倍体菌株的筛选取装有麦汁的试管(内装杜氏管),加入无水乙醇,使麦汁中酒精含量为16%,混匀。将AY-15的单倍体...
