第二章克隆技术经济管理学第一节什么是克隆经济管理学浙江师范大学克隆是英文clone的译音,一般是指生物的无性繁殖系,即由一母体经无性繁殖而繁衍的一群生物。讲一讲:植物中有无性繁殖现象吗?讲讲你所知道的自然界中的无性繁殖现象植物的无性繁殖扦插菊花、葡萄、月季和柳树等压条桂花、夹竹桃高空压条自然界中的无性繁殖现象嫁接自然界中的无性繁殖现象无性生殖现在一般认为生物学上有哪些层次的克隆呢?他们分别指什么?(目的)基因克隆分子水平的克隆:细胞水平的克隆:个体水平的克隆:植物组织培养动物克隆(核移植技术)植物细胞克隆:组织培养获得愈伤组织动物细胞的克隆(单克隆抗体的制备)基因克隆和细胞克隆是现代生物技术中的关键技术,在基础科研、遗传育种和肿瘤生物治疗等方面广泛应用学生活动:结合“基因工程”操作图解完成基因克隆的过程用特定的切割某个DNA分子(目的基因),把他重组到用切割过的上,再将这样的导入特定的,在被转化的宿主细胞中可以随着重组载体出大量的目的基因,再用某种探针选择、钓取。限制性核酸内切酶同种酶基因载体重组DNA(载体)宿主(受体)细胞复制(克隆)单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体植物克隆中国首例异体克隆动物--克隆北山羊绵羊“多利”世界首例胚胎克隆波尔山羊"津生"从理论上说,细胞核具有基因组全套遗传信息,生物的体细胞有潜力发育成胚胎和形成与核供体完全相同的克隆个体。1.用单个细胞进行个体水平克隆的理论基础是什么?细胞核具有基因组全套遗传信息,生物的体细胞有潜力直接发育成胚胎和形成与核供体完全相同的个体克隆。2.这三个水平上的克隆在技术上实现的时间顺序如何?你是如何推断的?细胞水平的克隆、分子水平的克隆、个体水平的克隆想一想:克隆技术的概念:从众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择目的基因或特定类型细胞的技术的操作。1.微生物克隆:克隆技术的发展由一个细菌分裂(复制)出多个和它完全一样的细菌而形成的菌落。2.遗传工程的克隆:例如:DNA克隆或基因克隆3.个体水平上的克隆:不通过两性细胞结合,直接从单一的细胞繁殖出生物个体微生物克隆细菌的二分裂大肠杆菌的分裂大肠杆菌的菌落广东诞生首例体细胞五头“克隆猪”个体水平上的克隆体细胞核移植胚胎细胞核移植中国首例异体克隆动物--克隆北山羊绵羊“多利”个体水平上的克隆(3)完成胚胎发育的必要的环境条件(1)具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞(2)能有调控细胞核发育的细胞质物质活动:结合“克隆羊多莉诞生”操作图解,阐述生物克隆需要具备哪些基本条件?尽管克隆技术有着广泛的应用前景,但离产业化尚有很大距离。因为作为一个新兴的研究领域,克隆技术在理论和技术上都还很不成熟。资料1:克隆技术存在的问题★在理论上,分化的体细胞克隆对遗传物质重编(细胞核内所有或大部分基因关闭,细胞重新恢复全能性的过程)的机理还不清楚;克隆动物是否会记住供体细胞的年龄,克隆动物的连续后代是否会累积突变基因,以及在克隆过程中细胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。★在实践中,技术尚不成熟,得到的克隆动物具有极大的偶然性和随机性。迄今为止,克隆试验的成功率始终很低。例如在培育“多莉“的实验中,融合了277枚移植核的卵细胞,仅获得了“多莉”这一只成活羔羊,成功率只有0.36%,同时进行的胎儿成纤维细胞和胚胎细胞的克隆实验的成功率也分别只有1.7%和1.1%。目前,多莉羊的制备还不能重复,更不能肯定克隆多莉羊的方法也适用于其它动物或其它不同组织器官的细胞。克隆动物夭折率高,不少克隆动物天生患有疾病或体形过大。克隆动物没有遗传物质的交流和互补,将会加剧一些遗传疾病的发生。资料2:珍稀动物的克隆繁殖•中国克隆大熊猫技术的三个关键问题,包括异种核质相容、囊胚着床和克隆个体三个阶段,前两个阶段的实验现已成功。克隆大熊猫的关键问题则是第三步,即大熊猫的胚胎能否在家猫或其他寄母的子宫中形成个体。•1990年5月,西北农...