神经生物学实验VIP免费

TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology脑立体定位和切片技术TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology脑立体定位技术TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology脑立体定位技术的简单流程TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology动物脑立体定位：利用颅骨的标志/参考点，确定皮层下某些神经结构的位置，利用脑立体定位仪对脑进行定向的刺激、破坏、药物注射、引导电位等研究的技术。主要用途：对神经结构进行定向的：注射（给药）埋管（慢性给药，透析）损毁记录（电生理）TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology前囟（Bregma）：位于冠状缝和矢状缝的交界处人字缝尖（lambda）：位于后囟人字缝与矢状缝的交汇点TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiologyBregma,前囟TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology动物脑立体定位：利用颅骨的标志/参考点，确定皮层下某些神经结构的位置，利用脑立体定位仪对脑进行定向的刺激、破坏、药物注射、引导电位等研究的技术。主要用途：对神经结构进行定向的注射（给药）埋管（慢性给药，透析）损毁记录（电生理）TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiologyKopf900StereotaxicKopf1404FrameAssembly立体定位仪：TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiologyStereotaxicDrillUnitAdjustableWireKnifeKopf5000MicroinjectionUnitTechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology立体定位仪：TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology游标卡尺原理根据游标上的分度格数，常把游标卡尺分为10分度、20分度、50分度。尺身上的最小分度是1毫米，游标尺上有10个小的等分刻度，总长9毫米，每一分度为0.9毫米，比主尺上的最小分度相差0.1毫米。尺身和游标的零刻度线对齐，它们的第一条刻度线相差0.1毫米。立体定位仪中坐标的读取主尺游标尺TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology游标卡尺按下列规则读数：（1）以游标零刻线位置为准，在主尺上读取整毫米数。（2）看游标上哪条刻线与主尺上的某一刻线（不用管是第几条刻线）对齐，由游标上读出毫米以下的小数。（3）总的读数为毫米整数加上毫米小数。TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology研究实例TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiologyMFB:(1)AP:4.4mm,ML:1.2mm,V:7.8mm;(2)AP:4.0mm,ML:0.8mm,V:8.0mm内侧前脑束（MFB）:从基底嗅区、旁杏仁核区和隔核出发投射至下丘脑侧部的一组复杂纤维。MFB的DA能神经纤维相对集中，相对小剂量的6-OHDA注入MFB能造成更多的DA能神经元死亡。TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology[器材和药品]立体定位仪、10％水合氯醛麻醉剂、1ml注射器、手术刀、组织剪、止血钳、牙科钻或骨钻、金属定位针、脱脂棉花、3%双氧水（H2O2）、缝针与缝线、75%酒精[实验动物]雄性SD大鼠，体重约200-300g实验准备TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology[操作步骤]1.立体定位仪的一般校验2.动物麻醉：动物称重后，水合氯醛溶液按3.6ml/kg作腹腔注射麻醉。3.头部固定：（1）插入耳棒:先将一侧耳棒轻轻插入外耳道，碰到骨性外耳道底后固定耳棒，继之同样固定另一耳棒。检查大鼠头部固定是否稳定，松斜，两侧耳棒刻度是否对称，轻移耳棒使两侧刻度一致，头位完全居中，再次固定耳棒。三个标准检测是否固定成功：鼻对正中，头部不动，提尾不掉（2）固定上颌：将大鼠的上门牙塞进上齿固定板的槽内，旋紧螺丝。从各方向推压动物头部，均不应出现移动。通过定位针的测量调节前后囟在同一矢状线上，并使前后囟在同一水平线上。TechniquesinNeurobiologyStateKeyLabofMedicalNeurobiology4.开颅：剪去头部的毛，用碘酒与酒精棉球消毒头部皮肤，沿矢状缝作切口，剥离筋膜及肌肉，推开骨膜，暴露骨缝，并用3%双氧水洗净，止血。5.脑内核团定位:(1)根据脑图谱，确定所要研究神经核团的立体位置（注意：所研究...