细 胞 活 力 检 测 在 细 胞 群 体 中 总 有 一 些 因 各 种 原 因 而 死 亡 的 细 胞 ， 总 细 胞 中 活 细 胞 所 占 的百 分 比 叫 做 细 胞 活 力 （ cell viability） 。 细 胞 活 力 测 定 方 法 有 MTT 法 、克 隆（ 集 落 ） 形 成 法 、台 盼 蓝 染 色 法 、3H 放 射 性 同 位 素 掺 入 法 等 。 其 中 MTT 法 以其 快 速 简 便 ， 不 需 要 特 殊 检 测 仪 器 、无 放 射 性 同 位 素 、适 合 大 批 量 检 测 的 特 点而 得 到 广 泛 的 应 用 。 但 MTT 法 形 成 的 Formazan 为 水 不 溶 性 的 ， 需 要 加 有 机 溶剂 溶 解 ， 由 于 在 去 上 清 操 作 时 会 有 可 能 带 走 小 部 分 的 Formazan， 故 有 时 重 复性 略 差 。 为 了 解 决 这 个 问 题 ， 研 究 人 员 又 开 发 了 很 多 种 水 溶 性 的 四 氮 唑 盐 类 ：如 CCK-8（ WST-8） 、XTT 等 。 MTT MTT 分 析 法 以 活 细 胞 代 谢 物 还 原 剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT 噻 唑 蓝 为 基 础 。 MTT 为 黄 色 化 合 物 ， 是 一 种接 受 氢 离 子 的 染 料 ， 可 作 用 于 活 细 胞 线 粒 体 中 的 呼 吸 链 ， 在 琥 珀 酸 脱 氢 酶 和 细胞 色 素 C 的 作 用 下 tetrazolium 环 开 裂 ， 生 成 蓝 色 的 formazan 结 晶 ， formazan结 晶 的 生 成 量 仅 与 活 细 胞 数 目 成 正 比 （ 死 细 胞 中 琥 珀 酸 脱 氢 酶 消 失 ， 不 能 将MTT 还 原 ） 。 还 原 生 成 的 formazan 结 晶 可 在 含 50%的 N,N-二 甲 基 甲 酰 胺 和20%的 十 二 甲 基 磺 酸 钠 （ pH 4.7） 的 MTT 溶 解 液 中 溶 解 ， 利 用 酶 标 仪 测 定 490 nm 处 的 光 密 度 OD 值 ， 以 反 映 出 活 细 胞 数 目 。 也 可 以 用 DMSO 来 溶 解 。 MTT 粉 末 和 配 置 好 的 溶 液 都 需 要 用 铝 箔 纸 包 好 避 光 保 存 。 实 验 的 时 候 尽 量关 闭 超 净 台...
