第1页 第十四章 临床化学常用分析技术 本章考点 1.临床化学常用分析方法 光谱分析、电泳技术、离心技术、层析技术、电化学分析技术的基本原理和应用 2.临床化学方法的建立 （1）方法建立的根据 （2）方法建立的过程 （3）方法的评价 （4）方法建立后的临床观察 第一节 临床化学常用分析方法 一、光谱分析（分光光度技术） 定义： 利用物质具有发射、吸收或散射光谱谱系的特征，以此来确定物质性质、结构或含量的技术，称为光谱分析技术。 它具有灵敏、快速、简便等特点，是生物化学分析中最常用的分析技术。 分类： （一）可见及紫外分光光度法 分光光度法的理论基础是朗伯－比尔定律。 1.Lamber－Beer 定律： A = k·b·c A 为吸光度 k——吸光系数 b——光径，单位：cm。 c——溶液浓度，单位：g／L 在可见-紫外分光光度法中，通常在测定未知样品浓度的同时，与同一个已知浓度的标准物作比较，可以利用以下公式计算而求出其浓度,即比较法。 其中Cx和Ax为标本管浓度和吸光度，Cs和As分别为标准管浓度和吸光度。 2.摩尔吸光系数：在公式“A=k·b·c”中，当c=1 mol／L，b=1cm 时，则常数 k 可用ε表示称摩尔吸光系数。 ε的意义是：当液层厚度为1cm，物质浓度为1mol/L 时在特定波长下的吸光度值。 ε是物质的特征性常数。 不同物质的摩尔吸光系数不同 3.比吸光系数：在公式“A=k·b·c”中，当c 为百分浓度（w／v），b 为cm 时，则常数 k 可用E%表示，称为比吸光系数或百分吸光系数。 （二）原子 吸收分光光度法 根据待 测元 素 的气 态 原子 能 吸收相 同原子 所 发射的特定波长的光，其吸收特性遵 循Lambert-Beer 定律，即在一定条 件 下，原子 的吸光度同原子 蒸 气 中待 测元 素 基态 原子 的浓度成 正 比。 第 2页 常 用 的 定 量 方 法 有 ： 1.标 准 曲 线 法 ： 将 一 系 列 浓 度 不 同 的 标 准 溶 液 按 照 一 定 操 作 过 程 分 别 进 行 测 定 ， 以 吸 光 度 为 纵 坐 标 ， 浓 度 为 横 坐 标 绘 制标 准 曲 线 。 在 相 同 条 件 下 处 理 待 测 物 质 并 测 定 其 吸 光 度 ， 即 可 从 标 准 曲 线 上 找 出 对 应 的 浓 度 。 由 于 影 响 因 素较 多 ， 每 次 实 验 都 要 重 新 制 作 标 准 曲 线 。 2.标 准...
